western blot / bradford assay 예비실험보고서

소개

실험과정, 결과및 고찰이 포함되지 않은 예비보고서입니다. 참고문헌은 각주에 포함되어 있습니다.

목차

1. 실험제목
2. 실험 날짜
3. 실험 목적
4. 실험 원리

본문내용

1. 실험제목 wetern blot
2. 실험 날짜
3. 실험 목적 western blot을 이용해 단백질을 검출하고 Bradford assay를 통해 단백질의 양을 확인하고 계산한다.
4. 실험 원리 western blot / Bradford assay / Bradford assay의 계산법(1차 방정식)
Western blot
Western blot은 샘플에서 특정 단백질을 항원 항체 반응 사이의 특이적인 결합을 이용해 시료 속에 위치한 단백질을 정성적/ 정량적으로 분석하는 방법으로 immune blot으로 불리기도 한다. 전기영동을 이용하여 단백질을 gel 상에서 크기에 따라 분리한 후, PVDF, nylon과 같은 membrane에 transfer한다. Membrane에 발광하는 probe가 붙어있는 항체를 붙여주는 항원 항체 반응을 이용해 찾고자 하는 특정 단백질을 검출한다. 여러가지 단백질 중 원하는 단백질을 보는 방법으로 fluorescence, radioactivity, enzyme reaction 등의 방법이 있다.
과정
1) transfer
Western blot은 SDS-PAGE를 통해 크기별로 분리해놓은 단백질을 이용한다. Transfer는 SDS-PAGE를 통해 분리한 단백질을 membrane으로 옮기는 과정이다. 단백질이 SDS-PAGE 과정으로 인해 (-) 전하를 띄는 성질을 이용한 것으로 gel(-) / membrane (+)로 하여 단백질에 전기장을 걸어주면 membrane 쪽으로 단백질이 이동한다.

참고자료

· 없음