[생물학실험 레포트]단백질의 전기영동

소개

"[생물학실험 레포트]단백질의 전기영동"에 대한 내용입니다.

목차

Ⅰ. 실험 목적

Ⅱ. 실험 원리
1) SDS-PAGE에서 단백질이 분리되는 원리
2) SDS
3) Stacking gel과 Running gel(Separating gel) - glycine단백질
4) Disulfide bond를 끊어주는 reducing agent

Ⅲ. 실험 기구 및 시약

Ⅳ. 실험 방법

Ⅴ. 실험 결과

Ⅵ. 고찰
1) 결론 분석
2) 결론에 대한 고찰 및 심화

본문내용

Ⅰ. 실험 목적

(1) 전기영동의 원리를 설명할 수 있다.
(2) 전기영동을 이용하여 단백질을 분리 및 분석할 수 있다.
(3) 전기영동을 통해 단백질의 특성을 설명할 수 있다.

Ⅱ. 실험 원리

1) SDS-PAGE에서 단백질이 분리되는 원리
처음 단백질의 solution은 SDS를 첨가한 후에 분석된다. 이 음이온화 detergent는 단백질을 denature시키고 단백질의 질량에 따라 일정 비율로 각 단백질을 (-)charge를 띠게 한다.
SDS가 없이는 분자량이 비슷한 다른 단백질들이 protein folding의 차이로 인해서 다르게 이동하는데, folding 방식의 차이에 따라 모양이 다르고 어떤 단백질들은 겔에서 다른 단백질보다 빠르게 이동할 수도 잇다. SDS를 첨가함으로 이러한 문제점들을 해결하고 선형으로 단백질을 만들어 분자량의 크기에 따라 분리할 수 있다.
Denature된 단백질은 PAGE의 Buffer에 잠겨 있는 PAGE의 한쪽 끝에 놓는다. 전류가 겔을 통해 흐르면 (-)charge의 단백질은 anode(+)로 이동하게 된다. Size에 따라서 각 단백질은 다르게 겔을 통과하는데 작은 단백질은 쉽게 겔의 pore를 통과하고 더 멀리가게 된다. 따라서 정해진 얼마의 시간이 지나면 size별로 이동성이 다르게 분리가 되어 있다. 큰 단백질은 시작점에 가까운데 반해 작은 단백질은 더 많이 이동하게 된다. 이후에 Coomassie Briliant Blue나 silver stain으로 염색한다. 염색이 끝나면 각각의 단백질들은 다른 밴드를 나타내게 된다. Marker 단백질을 사용하여 각 단백질들의 크기를 측정할 수 있다.

2) SDS
Sodium Dodecyl Sulfate(SDS) (C12H25NaO4S; mw; 288.38), SDS는 native proteins을 individual polypeptides로 denature하는 데 사용되는..

<중 략>

참고자료

· 생물학 및 실험I 실험서(교양교직부 생물실험실)