연세대학교 신촌캠퍼스 공학/일반생물학 2 실험 전체 결과레포트

소개

제가 만든 연세대학교 신촌캠퍼스 공학/일반생물학 2 실험 전체 결과레포트입니다.
>>PCR amplification, 제한효소 처리 & DNA 전기 영동 , transformation , miniprep, 광합성 색소의 분리, Ni-NTA agarose 수지를 이용한 단백질 정제, SDS PAGE, Blood typing, 쥐 해부<<
실험의 결과 레포트가 모두 실려 있습니다.

연세대학교 생물레포트는 유사도 검사를 하기 때문에 비슷하게만 쓰면 됩니다.

아시겠지만 유사도 검사때문에 제목 없이 1. 2. 이런식으로만 적혀 있습니다. 하지만 물어보는 순서나 문항은 학번과 무관하게 언제나 동일했기 때문에 그대로 사용하시면 됩니다.

목차

1. PCR amplification
2. 제한효소 처리 & DNA 전기 영동
3. transformation
4. miniprep
5. 광합성 색소의 분리
6. Ni-NTA agarose 수지를 이용한 단백질 정제
7. SDS PAGE
8. Blood typing
9. 쥐 해부

본문내용

1. PCR 실험, 2019.9.19.

2. PCR이라는 것은 DNA를 복제하는 중합효소연쇄반응이라는 생명공학 기술이다. 이번 시간은 이 PCR 실험을 해보고 원리를 완벽히 이해하기 위함이다.

3.
1조 2조 3조 4조 5조

1조가 우리 실험 조인데, 뚜렷한 DNA 복제 띠가 생기지 않았다.

4. PCR실험의 방해요소는 여러 가지가 있다. 프라이머는 DNA의 부분에 다발적으로 결합할 수 있는데 이때 띠가 여러 개로 나타나는 경우가 생긴다. 또, 여러 개의 프라이머가 붙어 중합체를 형성하거나 프라이머 자신이 2차 구조를 형성할 경우 PCR이 일어나지 않는다. 그리고 PCR이 염기 사이의 결합은 G-C(삼중결합), A-T(이중결합)가 서로 다르다는 것을 고려하면, 이 염기 조성에 따라 염기사이의 결합을 끊는 필요 에너지가 달라지고 PCR에 필요한 온도가 조성에 따라 달라져야한다는 것을 알 수 있다. 그러나 실험 시 이까지 고려하기 힘들기 때문에 PCR이 잘 안될 수 있다.
원래는 복제된 DNA는 전기영동 방식으로 분자의 무게, 크기에 따라 분리가 된다. 그러나 위와 같은 이유로 PCR이 잘 이루어지지 않았고 복제가 원활히 되지 않아 띠가 나타나지 않았다.

5.
1) 프라이머의 길이에 따라 PCR실험의 난이도가 달라지는데 이 사항에 대해 고찰해볼 필요가 있다. 우선 프라이머의 길이가 너무 길면 염기수도 길이만큼 같이 늘어나기 때문에 프라이머자체가 2차 구조를 형성해 PCR이 힘들어지고 표적 DNA에 정확히 결합하기도 힘들어진다. 이런 문제점이 지속되면 PCR이 이루어지는데 걸리는 시간이 길어지고 효율이 떨어지게 된다.
프라이머의 길이가 너무 짧아지는 것도 문제다. 프라이머의 길이가 짧으면 염기들의 서열이 단순해 DNA의 여러 곳에 결합하게 된다. 그렇게 되면 예상과 다른 DNA가 복제될 확률이 높아진다. 이것이 바로 여러 띠가 생성되는 주된 요인이다. 그러므로 프라이머는 너무 길지도, 너무 짧지도 않은 프라이머를 사용해야한다.

참고자료

· Campbell et al., 2015. Biology 10th Edition, Pearson Education p.452~457
· https://ko.wikipedia.org/wiki/%ED%94%84%EB%9D%BC%EC%9D%B4%EB%A8%B8 -Primer, Wikipedia
· https://en.wikipedia.org/wiki/Pfu_DNA_polymerase, “Pfu DNA polymerase