High-Performance Liquid Chromatography

소개

"High-Performance Liquid Chromatography"에 대한 내용입니다.

목차

1. Purpose
2. Principle & Theory
3. Apparatus & Reagent
4. Procedure
5. Result
6. Discussion & Feeling
7. Reference

본문내용

Purpose
HPLC를 이용해 게보린 속 아세트아미노펜의 함량과 박카스 속 카페인의 함량을 구한다.

Principle & Theory
◎ 순상 크로마토그래피
- 극성 정지상
- 극성이 강한 용매가 용리액 세기가 높다(용리액 세기↑ → 용질은 칼럼으로부터 더욱 빨리 용리됨)

◎ 역상 크로마토그래피
- 비극성 정지상 ex) C-18, C-8, C-4, Phenyl
- 극성이 약한 용매가 용리액의 세기가 높음
- 장점 1) 용리액에 포함되어 있는 극성 불순물에 덜 민감함
- 2) 정지상 내에 용질의 강한 꼬리끌기 현상을 제공하는 공간이 적어 봉우리 꼬리끌기 현상 을 제거할 수 있음
- 일반적으로 작은 분자량을 가지며 중성 or 전하를 띠고 있는 유기 혼합물의 분리에 적합함

◎ HPLC
- 물질의 분리 혹은 분취를 통한 정량을 위해 이동상을 액체로 사용하는 크로마토그래피 시스 템이다. 미세한 입자들로 충전된 막힌 칼럼을 통해 높은 압력으로 용매를 흘려주어 좋은 분 리능을 얻음.

1. HPLC의 구성
a) 탈기(Degassing) - 이동상 중의 용존산소, 질소, 기포 등을 제거함
b) 송액장치(Pump) - 이동상을 이동상 저장용기에서 끌여들여 시료주입기로 연속적으로 밀어줌.
요건: 일정한 압력과 유속 유지, 다양한 용매 사용
c) 시료주입기(Injectors) - 분석하고자 하는 시료를 용매의 흐름에 실어줌
d) 칼럼(Column) - 관 모양의 용기에 충진제를 채워 사용, 분석하고자 하는 시료의 종류 에 따라 칼럼의 크기 및 충진제의 종류를 선택하여 사용할 수 있음.
칼럼의 역할은 혼합 상태의 시료를 화학적/물리적 특성에 따른 머무 름 정도의 차이에 의해 분리할 Guard Column – 용매의 불순물 또 는 입자를 제거
e) 칼럼온도조절기(TCC) - 분리능 향상 및 분석결과의 재현성 보장을 위해 칼럼 온도를 적절하게 설정 및 유지함

참고자료

· Quantative chemical analysis, daniel. D. Harris
· 알기쉬운 기기분석
· 기기분석의 원리와 응용