간 조직의 핵산 추출액 제조 및 DNA 정량 영양화학 및 실험

목차

1. 실험목적 및 원리
2. 시약 및 준비물
3. 실험방법
4. 실험결과
5. 고찰
6. 요약
7. 참고문헌

본문내용

1. 실험목적 및 원리
1) 실험목적
간 균질액을 이용해 핵산을 추출하고, DNA 정량을 위해 시약들을 첨가한 후 흠광도를 측정해 그래프를 그려본다.

2) 원리
<실험 4-1>
⦁등전점과 단백질 전하: 등전점은 아미노산 또는 단백질이 전하를 띠지 않아 전기적으로 중성이 되며, 전장에서 이동하지 않을때의 pH이다. 단백질 수용액에서는 매질의 pH가 정한 값보다 작아져서 산성이 되면, 보통 아미노기가 보다 많이 수소이온를 얻어 양이온이 된다. 반대로 pH가 일정한 값보다 커져서 알칼리성이 되면 카복시기가 강하게 이온화하여 음이온이 된다. 이 일정한 값, 즉 중간에 전하가 0이 되는 pH가 존재하는데, 이 pH가 등전점이며 단백질에서는 약 4∼6인 값이 된다.

⦁알칼로이드 시약 특성: 알칼로이드를 검출 또는 확인할 때 사용하는 시약을 말한다. 침전 유무 혹은 그 색깔을 조사할 수 있는 침전시약과 용액의 정색을 조사하는 정색시약이 있는데, 전자에는 마이어시약, 드라겐도로프시약 등이 있으며, 후자에는 엘만시약, 프뢰데시약 등이 있다. 등전점 이하의 pH에서 양전하를 띠는 단백질은 산성기(H+)를 가진 TCA등의 알칼로이드 시약과 반응시키면 침전된다.

<중 략>

5. 고찰
이번 실험을 통해 간 조직의 핵산 추출액을 제조하고, DNA를 정량하는 방법에 대해서 알게 되었다. 특히 원심 분리기를 사용해, 핵산을 추출해 나가는 과정에 대해서 자세히 알 수 있었다.
<실험 4-1>
⦁안정성 측면에서 DNA/RNA와 온도, 산-염기와의 관계: DNA 용액은 90℃부터 변성이 시작되기 때문에, 90℃ 아래로 내려가면 안정성이 있다고 알 수 있다. RNA 용액도 마찬가지로 온도를 올리면 DNA와 같이 변성이 일어나므로 온도가 적당히 낮으면 안정성이 있다고 볼 수 있다. 산성 pH에서 DNA는 변성되지만 RNA는 안정하다. 반면에, 염기성 pH에서는 DNA가 안정하고 RNA가 불안정하다.

참고자료

· 김현숙, 이명숙, 차연수. 「최신 영양생화학 실험」. 교문사(2005)
· 부성희, 조만호, 이상원, 김기영. 「생화학 실험」. 청문각(2015)
· https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=513749&cid=42407&categoryId=42407
· [네이버 지식백과] 등전점 [isoelectric point, 等電點] (두산백과)
· https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=436952&cid=60261&categoryId=60261
· 네이버 지식백과] 알칼로이드시약 [alkaloid reagent, ~試藥] (생명과학대사전, 초판 2008., 개정판 2014., 도서출판 여초)
· https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=1158900&cid=40942&categoryId=32279
· [네이버 지식백과] 퓨린 [purine] (두산백과)