일반생물학및실험1 Cell counting (Colony Counting) [A+]

소개글

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목차

1. Title

2. Date

3. Name

4. Purpose

5. Materials

6. Methods
1) Serial dilution
2) Spreading
3) Colony Counting

7. Results

8. Discussion

9. Project
① 미생물의 세포량을 측정할 수 있는 방법을 조사하시오.
1) 직접 계산법
2) 평판배지를 이용한 방법
3) 분광광도계를 이용한 방법

10. Reference

본문내용

4. Purpose : 균의 colony forming 형태를 관찰하고, 대략적인 cell의 농도를 확인한다.

5. Materials
Escherichia coli, 균 키울 plate(LB plate), spreader, 알코올램프, Pipette, tip, ep-tube

6. Methods
Serial dilution
① 각 ep-tube에 증류수 900ul를 넣어준다.
② cell suspension 100ul와 증류수 900ul를 섞어준다.
③ 1000ul pipette으로 pipetting해준다.
④ 완성된 10-2로 dilution된 용액을 100ul옮겨주고 pipetting해준다.
⑤ 10-5 까지 희석액을 만들어준다.
Spreading
① LB plate에 실험한 날짜, 조, 이름, 접종 균주의 이름, 희석 정도를 labeling한다.
② pipette을 이용하여 미생물 배양액 100ul 따서 plate에 접종한다.
③ 멸균된 삼각봉을 이용하여 배양액을 골고루 펴서 도말한다.
④ 퍽퍽해지는 느낌이 들 때 까지 골고루 펴준다.
⑤ 도말이 끝난 배지는 뒤집어서 37도 incubator에 24시간 배양한 후, 형성된 colony를 관찰한다.

참고 자료

Electron Microscopy Science, “Petroff-Hausser Counting Chamber”, https://www.emsdiasum.com/microscopy/technical/datasheet/63512-20.aspx (2020년 6월 10일)
Slideplayer, “Microbiology: Principles and Explorations”, https://slideplayer.com/slide/5940725/ (2020년 6월 10일)
국립한국농수산대학, “2. 미생물 생장과 영양”, https://www.af.ac.kr/planweb/board/download.9is?fileUid=402885996584aa16016665b6ff075b27&boardUid=816ac6da51a3db470151b3d169a5019b (2020년 6월 10일)
물리학백과, “분광광도법”, https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=5810515&cid=60217&categoryId=60217 (2020년 6월 10일)
한국분석시험연구원(KATR), “평판배지와 일반세균수 측정법 !”, http://katr.re.kr/%E2%97%8F-%ED%8F%89%ED%8C%90%EB%B0%B0%EC%A7%80%EC%99%80-%EC%9D%BC%EB%B0%98%EC%84%B8%EA%B7%A0%EC%88%98-%EC%B8%A1%EC%A0%95%EB%B2%95/ (2020년 6월 10일)
한국분석시험연구원(KATR), “건조필름법(페트리필름)에 대하여 ##건조필름법,페트리필름,미생물실험##”, http://katr.re.kr/%E2%97%8F-%EA%B1%B4%EC%A1%B0%ED%95%84%EB%A6%84%EB%B2%95%ED%8E%98%ED%8A%B8%EB%A6%AC%ED%95%84%EB%A6%84%EC%97%90-%EB%8C%80%ED%95%98%EC%97%AC-%EA%B1%B4%EC%A1%B0%ED%95%84%EB%A6%84%EB%B2%95%ED%8E%98/ (2020년 6월 10일)