[생화학] 단백질 분리 및 염색

소개

2020년 1학기 연세대학교 생화학 강의 레포트입니다. 단백질을 분리하고 염색하는 실험입니다.

목차

1. 실험 목적 및 원리
2. 시료, 시약 및 기구
3. 실험 방법
4. 실험 결과
5. 고찰
6. 참고 문헌

본문내용

5주 차 실험으로 단백질을 분리하고 염색하는 실험을 진행하였다. 이번 실험을 통해서 전기영동의 원리를 이해하고, 지지체로 활용되는 겔의 종류와 역할을 이해하고 목적에 따른 적절한 젤의 종류와 조성을 제작할 수 있다. 또한 전기영동은 신체를 구성하는 중요한 성분인 단백질과 핵산의 연구를 위한 기초과정으로 이번 실험을 통해 전기영동을 수행하며 과정을 이해할 수 있다.
단백질을 분리하기 위해서 전기영동법(electrophoresis)을 활용하고, 단백질의 염색에는 Coomassie Blue Staining 방법을 이용하였다. 먼저 전기영동법을 이해하기 위해서 전기영동의 영어 단어인 electrophoresis 풀어보면 electro-는 전기와 연관되어 있음을 뜻하고, -phoresis는 전달을 의미한다. 즉 전기와 관련된 전달이며, 하전된 분자가 전기장이 적용된 용액의 내부에서 전극의 반대 방향으로 이동하는 원리를 활용한다. 이때 각 분자가 이동하는 속도는 다양한 요인에 의해서 조절되는데, 이 속도 차이를 활용해 생체 분자를 분리하고 분석하는 방법이다.
그렇다면 어떤 요인에 의해서 분자의 이동속도에 차이가 발생하는가? 그 요인은 크게 4가지가 있다. 첫 번째로 전하량이다. 전하량과 분자의 이동 속도는 비례의 관계를 띄어서, 높게 하전된 분자일수록 빠르게 이동한다. 두 번째로 마찰저항이다. 마찰저항은 이동 속도와 반비례 관계이다. 분자의 크기와 모양에 따라서 다른 마찰저항을 받는데, 크기가 클수록 마찰저항이 높아져서 이동 속도가 낮아진다. 분자의 크기와 분자의 이동 속도가 반비례한다는 점은 이번 실험에서 매우 중요하다. 또한, 분자의 모양에 따라서도 다른 마찰저항을 받는데, 구형 단백질과 선형 단백질이 존재한다면 넓게 퍼져있는 선형 단백질이 받는 마찰 저항이 크기 때문에 다른 조건이 동일할 때 구형 단백질보다 선형 단백질의 분자의 이동 속도가 더 느리다.

참고자료

· 가렛 생화학 4판, 라이프 사이언스
· Campbell, Campbell Biology 11th, Pearson Education
· Kreuzer, Massey, Biology and Biotechnology: Science, Applications, and Issues, ASM Press
· https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=5141506&cid=60266&categoryId=60266