DNA prep for tissue(braintumor)

목차

Ⅰ. Introduction
1. 실험 목적
2. Brain tumor

Ⅱ. Materials & Methods
1. Materials
2. Methods

Ⅲ. Results

Ⅳ. Discussion

본문내용

Introduction
1. 실험 목적: DNA preparation 원리를 이해하고 기법을 익혀 뇌종양 조직에서의 DNA를 추출할 수 있다.
2. Brain tumor
뇌종양은 종양이 두개골 안에 공간을 차지하고 있어 두개 내압(intracranial pressure, ICP)을 상승시킨다. 성인은 대부분 신경교세포에서 시작한다. 중추신경계에 발생한 뇌종양이 다른 곳으로 전이되는 경우는 드물지만, 중추신경계의 기능을 손상시키거나 중추신경에 직접적으로 작용하여 두개 내압을 상승시키고 심하면 죽음에 이르게 한다.
뇌종양의 발생에 유전학적 요소가 관여하며 크게 두 가지로 나누어 설명되고 있다. 첫째는 종양억제 유전자(tumor suppressor gene)의 소실이며, 둘째는 종양유전자(oncogene)의 발현이다.
정상세포의 세포분열 과정 중 자연발생적으로 염색체의 소실, DNA복제나 손상회복 기전의 결함 등이 발생하여 유전학적 표현 형태의 변화가 일어난다. 그러나 많은 경우에 외부의 돌연변이 유발물질(mutagen)이 원인이 되어 종양유전자와 종양억제유전자의 표현과 구조를 변화시켜 종양이 발생되며, 이러한 경우 돌연변이 유발물질을 발암물질(carcinogen)이라고 한다. 3가지의 주된 돌연변이 유발물질로는 방사선(radiation), 화학물질(chemical agents), 그리고 바이러스(virus)가 있고 이외에도 호르몬(hormone)이 있다.

Genomic DNA는 생명체가 살아가는데 필요한 모든 유전정보를 담고 있는 DNA를 말한다. 세포 내의 genomic DNA를 추출하기 위해서는 먼저 세포 용해가 이루어져야 한다. Cell lysis solution은 세포의 막을 효율적으로 용해시켜 안의 내용물이 흘러나오도록 한다. 이 때 DNA에 붙어있는 히스톤 단백질을 없애주는 역할을 하는 proteinase K를 함께 넣어주면 genomic DNA와 같은 높은 분자량의 DNA나 RNA를 얻을 수 있다.

참고자료

· 생명과학교재편찬위원회, 생명과학개론, 2009, 지코사이언스
· Sambrook and Russel. 2001. Molecular cloning third edition. Vol.1
· BioPhotometer Plus User Guide (Eppendorf)
· http://www.nanodrop.com
· brain tumor mutations detected in cerebral spinal fluid/ wenying pan, wei gu, 2015. 1. 20