Ba/F3 세포의 계대 배양 및 발현량 morphology 관찰 보고서

소개

"Ba/F3 세포의 계대 배양 및 발현량 morphology 관찰 보고서"에 대한 내용입니다.

목차

1. Introduction
2. 실험 목적
3. 실험 결과
4. 실험 고찰
5. References

본문내용

1. Introduction
1) Ba/F3 cell
Ba/F3 cell은 IL-3 independent mouse pro B cell line으로, 정확한 cell line의 origin은 불분명하나 May-Grunwald-Giemsa staining을 통해 lymphatic background의 cell임을 알 수 있다. 세포들은 BALB/c가 아닌 C3H mouse로부터 유래되었다.
IL-3(Interleukin3)는 cytokine superfamily에 속하는 potent growth factor이다. IL-3는 20-32kDa glycoprotein으로 구성되며, pluripotent hematopoietic stem cell, progenitor cell, 그리고 mature progeny의 증식과 분화를 돕는다. IL-3는 B lymphocytes의 growth factor로 작용하며, monocyte의 활성을 높이고 mast cell, eosinophils 그리고 stromal cell의 survival과 propagation을 증가시킨다. IL-3 receptor는 heterodimeric complex로 구성되며 alpha chain- IL3RA 와 beta chain CSF2RB로 구성되며, granulocyte macrophage colony stimulating factor 와 Interleukin 5도 인식한다. IL3 receptor에 IL3가 결합하면, 여러 가지 경로로 transcription을 조절하게 된다. 이번 실험에서는 이 pathway에 있는 단백질 중 하나인 phosphoERK와 phosphoSTAT3의 발현량을 관찰한다.

2. 실험 목적
- Ba/F3 cell의 계대 배양을 하고 IL3의 유무에 따른 단백질의 발현량을 비교해본다.
- IL3 첨가 시 세포의 morphology를 관찰한다.
3. Material and Method
1) Materials
Ba/F3 cell, RPMI, Newborn calf serum, IL3, PS(penicillin streptomycin), tryphan blue...... <중 략>

참고자료

· Cellsensor irf1-bla Ba/F3 cell-based assay protocol, Invitrogen, 11 April 2006
· IL3 signaling pathway, Raju, R. et al. (2011) NetSlim: high-confidence curated signaling maps. Database. 2011:bar032
· Palacios, R., Henson, G., Steinmetz, M., McKearn, J. P. (1984). Interleukin-3 supports growth of mouse pre-B-cell clones in vitro. Nature 309 (5964): 126-131