전기영동 실험보고서

최초 등록일
2020.02.28
최종 저작일
2019.09
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목차

Ⅰ. 목적

Ⅱ. 이론
1. Gel Electrophoresis
2. Agarose gel
3. Size marker

Ⅲ. 결과
1. 0.5% agarose gel
2. 0.7% agarose gel
3. 1.0% agarose gel
4. 2.0% agarose gel

Ⅳ. 고찰

Ⅴ. 참고문헌

본문내용

Ⅰ. 목적
1. Agarose gel 제작 과정과 전기영동의 원리에 대해서 이해한다.
2. Agarose gel 농도, 분자량에 따른 전기영동 이동 속도를 비교해본다.

Ⅱ. 이론
1. Gel Electrophoresis
선형 DNA를 비활성 젤리와 같은 다공성 gel matrix에 넣고 전기장을 걸면 DNA를 크기에 따라 분리할 수 있다. DNA는 음전하를 띠고 있기 때문에 전기장이 가해지면 겔에서 양극쪽으로 이동한다. DNA 분자는 유연성이 있으며, 유효부피를 지니고 있다. Gel matrix는 DNA 분자가 통과할 때 체처럼 작용한다. 즉, 크기가 큰 DNA 분자들은 작은 DNA 들보다 유효부피가 크기 때문에 gel의 pore을 통과하기가 어려워 더 천천히 이동한다. 따라서 일정 시간 동안 gel을 전기영동하면 이동거리가 달라져 크기가 다른 DNA 분자들이 서로 분리된다.
전기영동을 끝낸 후 DNA와 염기와 염기 사이에 끼어들 수 있는 ethidium과 같은 형광색소로 gel을 염색하고 자외선을 비추면 DNA를 볼 수 있다. 염색된 DNA 분자들은 gel에서 band로 나타나며, 각 band에는 특정 크기의 DNA들이 존재한다.

<중 략>

Ⅳ. 고찰
DNA는 전기적으로 음전하를 띄고 있어, (+) charge 쪽으로 DNA 분자가 이동을 하게 되는데, 전기영동시 gel matrix에 의해 분자량에 따라 pore에 걸리게 되고 이 부분을 염색하여 보게 되면 band로 보게 되는 것이다.
전기적 이동은 4가지 요인에 의해 좌우되는데, ①DNA 분자 크기, ②Agarose 농도, ③DNA의 물리적 형태, ④전기영동시의 전압에 의해 이동이 달라진다. 이 실험에서 모두 size marker를 사용하여 결과를 본 것이므로 linear 상태의 double strand DNA fragment라면 모두 DNA의 물리적 형태는 같을 것이다.

참고 자료

James D, Watson 외 5명, 양재섭 외 14명 역, 「왓슨 분자생물학 7판」, ㈜바이오사이언스, 2014, P148-149
김영희, 「분자생물학 실험서」, 월드사이언스, 2008, P81-82
https://www.ibric.org/myboard/read.php?id=53829&Board=new_protech
https://www.ibric.org/myboard/read.php?id=39869&Board=new_protech
https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=4353235&cid=40942&categoryId=32308

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