분자생물학실험 (분생실) Restriction Endonuclease Digestion (제한효소) 레포트 입니다.

소개

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목차

(1) 서론
1) 실험날짜(Date)
2) 실험목적(Purpose)
3) 이론적배경(Principle)

(2) 재료 및 방법
1) 실험재료(Materials)
2) 실험방법(Method)

(3) 실험결과(Result)

(4) 논의(Discussion)

본문내용

2) 실험 목적 (Purpose)
- Restriction Endonuclease Digestion의 정의와 방법에 대해 알아본다.

3) 이론적 배경(Principle)
- 정의 ; Enzyme digestion (restriction digestion, DNA fragmentation)은 restriction endonuclease를 이용하여 특정 sequence를 포함한 DNA를 특정 size로 잘라 시료를 준비하는 방법이다.
- Restriction endonuclease(restriction enzyme) ;
가. 정의 ; nuclease의 일종으로 특정위치 (restriction site)의 DNA 분자 내 phosphodiester bond를 잘라내는 효소를 의미한다. (Nuclease에는 DNA strand의 말단에서 nucleotide를 하나씩 제거하는 ‘Exonuclease’와 DNA strand 내에서 내부의 phosphodiester bond를 끊는 ‘Endonuclease’가 있다.)
나. 분류 ; Restriction modification system(RM system)에 따라 3가지 type으로 구분한다
1. RM system ; Bacteria를 포함한 prokaryotic organism에서 외부 DNA 유입에 대응 하기 위한 기작으로, restriction enzyme의 작용(restriction)과 self DNA를 보호하기 위한 방법인 methylation을 포함한다.
2. Type 1 enzymes
가) Restriction digestion과 modification을 모두 수행한다.
나) Mg2+, S-adenosylmethionine, ATP를 cofactor로서 필요하다.
다) DNA restriction site가 non-specific하고 fragment의 size는 1000bp 이상인 경우도 있다.
라) Target DNA가 잘리기 전에 modification되기 때문에 유전공학적 가치는 떨어진다.

참고자료

· Asubel, Fredirick M / Current Protocols In Molecular Biology / Wiley / 2003 / pp338-359
· CARSON, Susan / Molecular Biology Techniques pbk / Elsevier / 2012 / pp29-34