[일반생물학실험] DNA추출/PCR/전기영동(의대A+)

목차

1. 실험의 목적
2. 실험 재료 및 기구
3. 실험 방법
4. 실험 결과 분석 및 고찰
5. 참고 문헌

본문내용

<실험의 목적>
- 식물에서 genomic DNA를 추출하는 방법을 알고 그것이 어떤 목적으로 이용이 되는지를 알아본다.
- PCR 원리를 이해하고 DNA를 증폭해본다.
- 식물 genomic DNA를 전기영동 했을 때의 양상을 알고 그 원리를 이해한다.
- 식물 genomic DNA의 추출과 DNA 전기영동의 수행과정을 습득한다.

<중 략>

<실험 방법>
(1) DNA 추출
① 브로콜리 잎 끝 부분을 0.2g 저양한 후 막자사발에 담고, PA buffer 600μl과 RNase A 2μl를 넣은 후, 막자를 이용해 브로콜리를 곱게 간다.(덩어리가 아예 보이지 않을 정도로 곱게 간다.)
② 브로콜리 cell lysate를 800μl씩 1.5ml microtube에 담는다.(Volume 정확히!)
③ 60C에 5분간 incubation하고 온도를 유지하면서 inverting 및 약한 vortexting을 5분간 지속한다.
④ 원심분리(13000rpm, 7min)후 상층액을 500μl씩 깨끗하게 따내어 spin column으로 옮긴다.(단, 브로콜리 입자가 섞어 들어가지 않는다.)

참고 자료

Jane B.Reece, 2011, Campbell Biology 7th edition, PearsonEducation
http://www.ibric.org/myboard/read.php?Board=exp_qna&id=529081
http://study.zum.com/book/15167
https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=422029&cid=60261&categoryId=60261