Plant genomic DNA isolation

목차

Ⅰ. Materials

Ⅱ. Methods

Ⅲ. Result
1. 내 결과에서 DNA가 보이지 않는 이유
2. band가 smear하게 나타나는 이유

Ⅳ. Discussion
1. CTAB buffer 조성 및 원리
2. CI(Chloroform : Isoamylalcohol = 24 : 1)
3. Isopropyl alcohol (Isopropanol, IPA)
4. Ethanol precipitation
5.DNase, RNase A

Ⅴ. Reference

본문내용

Ⅰ. Materials
Plant, CTAB buffer, pestle, heat block, ice box, CI, Isopropanol, Ethanol, RNase A, D.W., 1.5ml microcentrifuge tubes, microcentrifuge, pipette, tip, latex gloves, etc

Ⅱ. Methods
1. 식물체의 잎을 2-3장 추출한 후, pestle을 이용해 갈아주고, 500ul의 CTAB buffer를 넣고 잘 섞어준다.
2. 잘 섞은 뒤, 55℃로 맞춰 놓은 heat block에 15분간 처리한 후 ice box에 꽂아둔다.
3. 같은 용량의 CI(Chloroform : Isoamylalcohol = 24 : 1)를 넣고, inverting한다.
4. 12000rpm에서 1분간 원심 분리한다.
5. 상층액을 채취해 새로운 tube에 넣고, 상층액과 동량의 Isopropanol(IPA)을 넣어준다.

참고 자료

남상욱, 권혁빈, 최선심, 유전공학의 이해, 라이프 사이언스, p50~52
이병무, 유전자 클로닝과 DNA분석, 월드사이언스, p32~33
www.bric.com
위키백과
http://www.ibric.org/myboard/read.php?Board=exp_qna&id=37568