단백질 정량법 비교(BCA, Bradford assay)

소개

"단백질 정량법 비교(BCA, Bradford assay)"에 대한 내용입니다.

목차

Ⅰ. 실험 방법
Ⅱ.실험 결과 ( result )
Ⅲ. 실험고찰
Ⅵ. 참고 문헌 (Reference)

본문내용

Bradford assay는 Coomassie dye가 salt, detergent, 특히 지방 등에 의해 영향을 받고 발색반응을 이용한 단백질의 정량은 시간이 지날수록 결과 값이 달라지는 경우가 생기기 때문에 되도록 빠른 시간 내에 시행해야 한다는 단점이 있다.
그래서 이론적으로 BCA assay가 Bradford assay보다 더 신뢰성있는 데이터가 나올것으로 예상했는데, 예상대로 BCA assay 실험에서 R제곱값이 1에 가깝게 나왔다.
그렇다면 왜 Bradford assay시 신뢰성이 떨어진 데이터가 나왔는지 조사해봤다.
본 실험시 BSA첨가량이 3,6,9ul로 아주 소량을 넣었는데, 최소 첨가량이 10 ul 정도는 넣어야 적절한 데이터를 얻을수 있다고 한다. 왜냐하면 BSA와 같은 단백질의 경우 tip에 흡착이 되어 첨가하는 과정에서 오차를 크게 유발할 수 있기 때문이다.

참고자료

· 동국대학교 화공생물공학과, “화공생물공학 단위조작실험1”,화공생물공학과,2019, p. 51-p.54
· 동국대학교 화학과 화학실험실, “일반화학 실험”, 녹문당, 2014, p. 81-p.83
· 권혁빈 외 8인, “일반생물학실험”, 유한문화사, 2001, p.124-p.128