Agar well diffusion assay

소개

ntimicrobial test의 방법 중 하나인 Agar well diffusion assay 방법을 이용하여 항생물질의 항균력을 측정해본다.

목차

1. Abstract
2. Introduction
3. Materials & Methods
4. Results & Discussion
5. Reference

본문내용

1. Abstract
이번 실험에서는 Antimicrobial test의 방법 중 하나인 Agar well diffusion assay 방법을 이용하여 항생물질의 항균력을 측정해보는 것이 실험목적이다. 실험방법은 먼저 Log phase의 Indicator bacteria (Lb. plantarum NCDO 955) 배양액을 petri dish에 접종하고(106cfu/plate) MRS agar를 pour plating 해준다. 배지가 굳으면 코르크 보러로 배지를 구멍 내어 멸균된 이쑤시개로 제거해 3개의 well을 만든다. 항균성을 시험할 균주 (P. acidilactici HW 01)를 37℃ 에서 24시간 동안 배양한 MRS broth 10mL를 원심분리 한 후 상등액을 취하여 Membrane filtration 으로 Filtering 한 후 시험에 필요한 양을 나누어 하나는 pH 6.5로 조절하고 하나는 조절하지 않는다. 그 다음 3개의 Well에 각 각 pH 조절 상등액 / pH 미 조절 상등액/ Fresh MRS media를 100ul 넣어준 후 저온에서 흡수시키고 배양하여 well 주변에 Clear zone생성 유무와 크기 등을 비교한다. 우리조의 실험결과, 3개의 well에 생성된 clear zone 평균 지름(cm)은 well 넣어준 물질에 따라 MRS 배지 : 0 / pH 조절 상등액 : 1.87 / pH 미조절 상등액 : 1.93으로 측정되었다. 또한 고찰을 통해 실험 시 주의사항과 clear zone 생성에 영향을 줄 수 있는 요인들에 대해서 살펴보았다.

2. Introduction
(1) Agar well diffusion assay 와 Paper disk assay 실험의 차이 및 이유
① Paper disk assay
일정량의 항생물질이 함유된 종이 disk를 균체를 도말한 고체 배지 위에 놓으면 항생물질이 확산되어 나가면서, 검체균이 감수성인 경우 성장 저지환이 생긴다.

참고자료

· 조규성. 식품미생물학 실험. 2012. 문운당, p.164-170.
· 강인수 외 6명. 식품미생물학. 2000. 훈민사, p.149-152.
· 정동효. 신편 식품 미생물학. 1999. 선진문화사, p.110-114.
· 박진용 외 4명. 박테리오신의 특징과 응용. 2006. 신라대학교 자연과학연구소, p.40-57.
· [논문] 최정임. Methicillin resistant staphylococcus aureus에 대한 chitosan의 항균성과 항균시험방법에 관한 연구. 2000. 이화여자대학교 대학원, p.137-145.