Gram staining

소개

Gram staining을 통하여 bacteria가 Gram-positive 또는 Gram-negative로 분류되는 원리와 방법을 숙지한다.

목차

1. Abstract
2. Introduction
3. Materials & Methods
4. Results & Discussion
5. Reference

본문내용

1. Abstract
이번 실험에서는 Gram staining을 통하여 bacteria가 Gram-positive 또는 Gram-negative로 분류되는 원리와 방법을 숙지하는 것이 목적이다. 실험방법은 화염멸균된 백금이를 이용하여 MRS고체배지와 EC고체배지에 배양된 colony를 1백금이 취한 뒤 각 각 slide glass에 넓게 도말한 후, 물을 이용해서 다시 한번 넓게 도말하고 알코올 램프 위에서 열고정 시켜준다. 그 다음 Crystal violet 염색약, Iodine 시약, 95% ethanol, Safranin O 시약을 차례대로 slide glass에 2~3방울 떨어뜨린 후 일정시간이 지나면 washing하는 작업을 반복해준다. 마지막으로는 slide glass의 물기를 잘 제거한 후 cover glass를 덮고 현미경으로 관찰한다. 실험결과, 관찰된 색을 통해 L. bulgaricus는 Gram-positive, E. coli는 Gram-negative bacteria임을 확인 할 수 있었고 L. bulgaricus가 E. coli에 비해 긴 간균형태를 나타냄을 확인할 수 있었다. 하지만 우리 조의 경우 L. bulgaricus, E. coli 모두 적정량을 취하지 못해 현미경으로 관찰하는데 어려움을 겪었는데 이 외 염색과정에서의 주의점에 대해서도 고찰을 통해 알아보았다.

2. Introduction
(1) Gram-positive, Gram-negative bacteria의 차이
-Gram 양성균과 Gram 음성균의 구조적 차이점
① S-layer : S -layer는 세균이 생존하는 데 중요한 역할을 하는 구조로서, 세포의 가장 외측에 위치하는 것으로 외부 환경으로부터 세포를 보호하는 역할, 물체의 표면에 흡착하는 역할, phage의 수용체가 되는 기능을 가지고 있다. 이것이 외부 환경으로부터 세포를 보호하는 기능은 S-layer가 있는 그람 양성 세균이 murein 분해효소, protein 분해효소 등에 내성을 갖는 것으로 확인되었다.

참고자료

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