세포학 MTT실험 예비노트, Culture/MTT assay

소개

MTT assay 세포학 실험을 위해 조사한 예비노트입니다.
많이 참고하세요!

목차

Ⅰ. Cell Culture
1. Cell Culture 정의
2. 계대배양
3. Cell Line
4. Media의 종류
5. Culture 와 Seeding의 차이

Ⅱ. MTT assay
1. 목적
2. 원리
3. 방법
4. 세포독성
5. Tetrazolium Salt의 종류

본문내용

Ⅱ. MTT assay
1. 목적
MTT assay는 살아있는 세포를 정확하게 측정하여 세포의 증식 또는 사멸도 변화를 평가하는 실험이다.

2. 원리
담황색물질의 MTT는 살아있는 세포의 미토콘드리아에 있는 효소로 테트라졸리움고리가 개열하여 암청색의 포르마잔(formazan)으로 변화한다. 변화량은 흡광도를 측정함으로서 정량화 할 수 있다. 죽은 세포는 MTT를 MTT-포르마잔으로 환원시키지 못하고, 이 포르마잔 생산량이 살아 있는 세포의 수와 유의하게 상관한다는 점에서 세포증식능, 혹은 세포상해성의 측정법에 사용한다.
살아있는 세포에 MTT를 처리하게 되면, MTT가 미토콘드리아에 있는 reductase에 의해 환원되어 formazan이라 불리는 crystal을 형성하게 된다. 하지만 죽은 세포에서는 미토콘드리아가 이미 깨져 없기 때문에 reductase도 존재하지 않고, formazan도 형성되지 않는다. 살아있는 세포의 수가 많을수록 이 크리스탈의 생성도 많아지므로 이러한 방법을 통해 세포의 성장을 쉽게 측정할 수 있다.

참고자료

· ARSHADCHAUDRY, "Cell Culture", Retrieved 2006-04-19, <http://www.scq.ubc.ca/cell-culture>, (2018.10.15)
· Ryan KJ, Ray CG (editors) (2004). 《Sherris Medical Microbiology》 4판. McGraw Hill. ISBN 0838585299.
· Madigan M, Martinko J (editors). (2005). 《Brock Biology of Microorganisms》 11판. Prentice Hall. ISBN 0131443291.
· “tetrazolium salt 예”, http://www.daeillab.co.kr/contents/bbs/bbs_content.html?bbs_cls_cd=002003001001&cid=12062909473035&bbs_type=G, (2018.10.15.)