<SDS-PAGE를 이용한 단백질 전기영동> 실험 결과보고서

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2018.09.24
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2017.10
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'SDS-PAGE를 이용한 단백질 전기영동' 이라는 주제의 실험을 진행한 후 직접 작성한 생물공학실험 결과보고서 입니다. 내용이 잘 정리되어 있어서 관련 실험을 하시는 분들에게 많은 도움이 될 것 같습니다.

목차

1. 실험 제목

2. 실험 목적

3. Questions
(1) SDS-PAGE에서 단백질이 분리되는 원리는?
(2) SDS의 역할은?
(3) Stacking gel과 running gel이 하는 역할은?
(4) 2-propylalcohol을 사용하는 이유는?
(5) Disulfide bond를 끊어주는 reducing agent를 두 가지만 쓰시오.
(6) 실험에서 사용한 running gel에서 acrylamide의 최종 농도를 계산하시오. (답만 쓰지말고 계산 과정을 쓸 것)
(7) 실험에서 사용한 sample 결과 분석(실험에서는 2가지 sample을 사용)
이번에 준비된 sample은 저희 실험실에서 배양한 cells의 배양액에 있는 Acid α-glucosidase, Albumin erythropoietin (Alb-EPO)를 이용하였습니다. 각 band를 비교하여, 각각 무슨 sample인지와 결과를 분석해주세요. (앞서 말한 두 가지 protein의 band 외에 α-amylase band도 나타나기 때문에 잘 구별해서 쓸 것)
(8) Coomassie blue의 염색원리와 staining & destaining solution에 methanol이 들어가는 이유를 쓰시오.

4. 결과 분석 및 고찰

본문내용

1. 실험 제목 : SDS-PAGE를 이용한 단백질 전기영동

2. 실험 목적 : SDS-PAGE를 이용한 단백질의 전기영동 원리를 이해하고 주어진 sample의 전기영동 패턴을 비교하여 분석하는 방법을 익힌다.

3. Questions (각 5점)
1. SDS-PAGE에서 단백질이 분리되는 원리는?
초기 단백질 solution은 SDS가 첨가된 후에 2차 구조와 non-disulfide bond에 의한 4차 구조가 denature된다. 또한 단백질의 질량에 따라 일정 비율로 각 단백질이 음전하를 띄게 된다. SDS가 첨가되지 않았을 때는 분자량이 비슷한 다른 단백질들이 protein folding의 차이로 인해 다르게 이동하는데, folding 방식의 차이에 따라 어떤 단백질들은 gel에서 다른 단백질보다 더 빠르게 이동한다. SDS를 첨가함으로써 이러한 문제들이 해결되고 선형으로 단백질을 만들어 분자량의 크기에 따라 단백질을 분리할 수 있게 된다.

참고 자료

없음
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