단백질 추출 및 SDS-PAGE 실험 예비레포트

목차

1. 실험목적
2. 실험이론
3. 실험기구 및 시약
4. 실험방법
5. PAGE 제조 및 Running 조건
6. 염색법
7. 실험시 주의사항
8. 참고문헌

본문내용

실험목적
대장균의 주변세포질에서 삼투압을 통해 단백질을 분리하여 SDS-PAGE 분석 방법으로 검출함.

실험이론
전기영동
전기영동은 하전된 입자가 전기장에서 반대 전하의 전극 쪽으로 이동한다는 것에 기초한다. 거대분자는 전하, 모양, 크기 등에 따라 이동성이 다르다. 종이와 용액을 비롯하여 여러 가지 지지매체가 전기영동에 사용되었으나, 가장 흔히 쓰이는 지지체는 칼럼크로마토그래피에 사용되는 것과 유사한 아가로오스나 아크릴아마이드의 중합체이다. 지지매체에 만들어 놓은 구멍[웰(well)]에 시료를 넣는다. 분리되는 정도를 원하는 대로 되게 하려면 적당히 전압을 조절하여 매체를 따라 전류를 건다. 단백질이 젤 상에서 분리되면 젤을 염색하여 단백질의 위치가 보이게 한다.

Agarose gel & Polyacrylamide gel
겔 전기 영동법에서 주로 사용되는 지지체로는 아가로스 겔과 폴리아크릴아마이드 겔이 주로 사용되는데 아가로스 겔은 주로 핵산의 분리에 사용되고, 이번 실험에서와 같이 단백질을 분리 할 때에는 주로 폴리아크릴아마이드(Polyacrylamide ; PAM)를 지지체로 사용 한다.

참고 자료

Mary K.Campbell 외 1인, “Biochemistry 7th ed”, ThomsonBrooks/Cole, 2011.
강영희, 생명과학대사전, 아카데미서적, 2008.