균수 측정법의 이해 및 생균수 측정(Standard agar plate count)

목차

1. Introduction
2. Objectives
3. Materials and methods
4. Results
5. Discussion and conclusion
6. Reference

본문내용

1. Introduction
시료 중 미생물의 개체수를 측정하기 위하여 가장 일반적으로 사용되는 한천배지를 이용한 평판계수법(Pour plate, spread plate)을 실습한다. 일반적으로 시료 중 미생물의 개체 수는 육안으로 셀 수 없을 정도로 높은 경우가 많기 때문에 확률론에 근거하여 적정 농도로 희석한 후 개체수를 측정한다. 일반적으로 평판배지 당 집락수(CFU)는 30-300개를 통계적으로 신뢰성이 있는 유효범위로 판단하고, 이를 계수한다.

2. Objectives
① 미생물 실험의 기초 및 확률론에 근거한 정량분석의 기본 원리를 이해한다.
② 미생물 정량분석의 다양한 기법을 실습하고 균수 측정 및 계수법을 익힌다.

3. Materials and methods
1) Materials
- 실험복, Latex glove, 네임펜
- 시료(미지의 농도 A,, B, C, D, E), 물
- 기구 : Pipette 1000p, 100p or 200p, 멸균 pipette tip(1000p tip, 200p tip), 멸균 spreader, 멸균 petri dish, 멸균 test tube, hazard bag, vinyl bag, 70% 알코올 분무기
- 시약 : Tryptic Soy Agar(TSA), 0.85% 멸균 saline
- 기기 : Autoclave, Clean bench, incubator, counter

2) Methods
① 0.85% 멸균 saline을 test tube에 9 ml씩 담고 네임펜으로 labeling 한다. 멸균된 petri dish들도 날짜, 조이름, 시료 number, 희석배수를 네임펜으로 labeling 한다.
② 미지의 시료를 vortexing 해준 후 Blue Pipette을 이용해 1 ml을 따서 9 ml의 0.85% 멸균 saline에 십진 희석한다.
③ 위와 같이 총 5개의 test tube에 5번 십진 희석한다.

참고자료

· 위생학 실험 강의자료. 2016. 균수 측정법의 이해 및 생균수 측정.
· 식품의약품안전청. 2010. 사카자키균 RISK PROFILE, 3, 5, 6, 11쪽.
· 식품미생물학 실험서. 2012. 홍재훈. 142-145쪽.
· 식품미생물학. 2014. 이종경 외 3인. 162-163쪽.