[동물면역학실험]인간 혈액으로부터 말초혈액단핵세포 (PBMC) 분석

소개

본 실험은 혈액의 구성 중 하나인 PBMC만을 혈액으로부터 분리해 내고, 분리 된 PBMC 속 면역세포들의 구성과 변화를 살펴보는 것을 목적으로 실험한 레포트입니다.

FACs(flow cytometry)를 활용한 실험입니다.

목차

1. 실험 목적
2. 실험 이론 및 원리
3. 실험 방법
4. 실험 결과
5. 토의 사항
6. 참고 자료
7. 참고 문헌

본문내용

2. 실험 이론 및 원리
가. Peripheral Blood Mononuclear Cell (PBMC)
말초혈액단핵세포는 lymphocyte나 monocyte처럼 둥근 모양의 핵을 가지 혈액세포를 말한다. 이러한 혈액세포들은 감염이나 침입자에 대해서 방어하는 면역시스템에서 중요한 구성요소로서 작용한다. Lymphocyte의 population은 T cells (CD4 and CD8 positive)이 75%를 구성하고 있으며, B cell과 NK cells은 25%를 차지하고 있다.

백혈구수 (WBC)
3200~9800/㎣
호중구전단계 (Band neutrophil)
3~5%
호중구 (Neutrophil)
54~62%
림프구 (Lymphocyte)
25~33%
단핵구 (Monocyte)
3~7%
호산구 (Eosinophil)
1~3%
호염기구 (Basophil)
< 1%
일반적인 사람 정상 혈액에서 각 면역 세포들의 비율

나. Flow cytometer(FACS)의 원리 및 응용
1) Flow Cytometry의 발전 역사
1930년 스웨덴 Karolinska Institute의 Caspersson이 세포내 핵산과 단백질 양을 측정하기 위해 microspectrophotometer를 개발한 것이 가장 시초이다. 1947년 Northwestern대학(미국)의 Gucker등에 의해 공기를 빠른 속도로 주입하면서 검체를 실려 보내고 입자가 통과하면 빛이 산란되어 photodetector에서 전기 신호를 검출해낼 수 있는 최초의 Flow cytometer가 개발 되었다. 1950년 형광 항체가 개발되었으며 이즈음 hematology counter가 도입되기 시작하였다. 형광 측정이 cytometry에 도입된 것은 1960년대에 들어서서 DNA content 분석을 시도하고 부터였다. 1970년대에는 Herzenberg 들에 의해 fluorescence flow cytometry와 cell sorting법이 개발되어 살아있는 세포를 분리하여 연구에 사용할 수 있게 되었다.

참고자료

· 병태생리학., 박지원, 유지수. 김정화 저. 군자출판사. 2004
· Sabine Cepok, Marc Jacobsen, Sabine Schock, Bilal Omer, Steffi Jaekel, Inke Böddeker, Wolfgang H. Oertel, Norbert Sommer and Bernhard Hemmer, Patterns of cerebrospinal fluid pathology correlate with disease progression in multiple sclerosis., Brain, Vol. 124, No. 11, 2169-2176, November 2001.