[면역학실험]ELISA를 이용한 토끼에서 살모넬라균의 항체 검출

소개

매주마다 토끼에게 Salmonella균을 주입하고 ELISA라는 실험방법을 통해 Salmonella균에 대한 생성된 항체의 양을 측정해보는 실험레포트입니다.

목차

1. 실험 목적
2. 실험 이론 및 원리
3. 실험 기구 및 시약
4. 실험 방법
5. 실험 결과
6. 토의 사항
7. 참고 문헌

본문내용

1. 실험 목적
매주마다 토끼에게 Salmonella균을 주입하고 ELISA라는 실험방법을 통해 Salmonella균에 대한 생성된 항체의 양을 측정하는 것이다.

2. 실험 이론 및 원리
살모넬라균
장내세균과에 속하며 사람과 동물에 병원성을 나타내어 티푸스증이나 급성위장염, 식중독 등을 일으키는 세균이다. 살모넬라에는 균체항원(O항원)과 편모항원(H항원)에 수십 종류가 있고, 또한 Vi항원이 가해져서 이들 항원의 조합으로 항원을 달리하는 2,000 이상의 혈청형이 있다.

실험 요약
항체를 만들어내기 위해서 Salmonella균을 토끼의 체내에 주입한다. 그러면 토끼의 체내에서 항체가 만들어지고, 만들어진걸 확인하기 위해서 채혈을 한다. 이 때 채혈한 피에는 Salmonella균에 대한 항체가 들어있다. 이러한 피를 원심분리시키면 혈청과 혈병이 분리되는데, 그 때 상층액을 혈청이라 한다. 그리고 항체가 생성된 혈청을 항혈청(Antiserum)이라 한다. ELISA라는 실험방법을 사용하여 항혈청을 통해 항체의 생성된 정도를 알 수 있다.

ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay)의 원리 및 응용
효소의 작용으로 면역글로불린의 존재를 확인할 수 있는데 이러한 효소를 표식자로 하여 항원-항체반응을 이용한 항원 또는 항체량 측정 방법을 ELISA라고 한다. 이 면역학적 검사방법은 항체 분자에 효소를 공유결합으로 부착시켜 높은 특이성과 민감도를 가지기 때문에 정성 및 정량분석에 유리하며 임상적으로 널리 쓰이고 있다.(0.001-0.01μg/㎖까지 측정가능) 이 기법은 효소의 촉매작용과 항체의 특이성에 변화를 주지 않고 효소를 공유결합시킨 항체를 사용한다. 전형적인 결합효소로는 Horseradish peroxidase(과산화효소), Alkaline phosphatase, β-galactosidase를 사용하는데 이들 모두는 반응생성물이 색깔을 나타내어서 매우 적은 양으로도 측정될 수 있는 반응을 촉매한다. ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay)에는 세 가지 기본적인 방법이 있다.

참고자료

· Methods in Molecular Biology vol.1318 ELISA Methods and Protocols