cloning

목차

1. Cloning 이란
2. Cloning의 핵심과정
3. Polymerase Chain Reaction (PCR)
4. PCR 과정
5. Vector의 기능
6. Vector의 종류
7. Plasmid Vector
8. Bacteria Plasmid의 종류
9. Primer 디자인
10. 제한효소(restriction enzyme)
11. Ligation
12. Transformation의 개념
13. Transformation 방법
14. Competent cell 이란?
15. 항생제를 이용한 selection

본문내용

Cloning 이란
Clone이란 Identical 하다는 것.
즉, Gene clone 이란 같은 유전자를 가지는 집합이며, clone을 만드는 과정 자체를 의미함.

Cloning의 핵심과정
① Gene cloning의 1단계 - 원하는 유전자를 얻어낸다.
내가 원하는 유전정보를 가지는 Target gene template를 얻는 과정. PCR 산물을 insert로 사용 할 수 있고, Vector 안에 삽입된 형태의 insert를 사용 할 수도 있다.

② Gene cloning의 2단계 - 얻은 유전자를 vector에 삽입한다.
Insert와 Vector의 end가 상보적으로 결합 할 수 있도록 Digention 해주고, Ligation 해주는 과정.

③ Gene cloning의 3단계 -유전자가 삽입된 DNA를 세포 내로 주입한다.
DNA를 bacteria 세포 내로 주입하는 과정으로써, 우리가 원하는 DNA를 복제하기 위해서 bacteria 세포를 사용함.

④ Gene cloning의 4단계 - 올바른 clone을 선택한다.
Bacteria cell 내에서recombinant DNA만을 얻고, 내가 원하는 유전정보를 가지고 있는지 확인하는 과정.

참고자료

· 없음