생화학개론 레포트 : 유전물질 전기영동 실험

소개

기초 생화학 관련 실험 레포트입니다. A4 10페이지 분량이며 유전물질 전기영동과 관련한 자료입니다.

목차

1. 실험 목적
2. 실험 원리
3. 실험 시약 및 실험 기구
4. Methods (실험 방법)
5. Results (결과 분석 및 설명)
6. Discussion (결과에 대한 고찰)
참고문헌

본문내용

실험 목적

- 실습에 필요한 도구들의 사용법을 익히고, 완충용액(buffer)의 이론과 역할을 이해한다. 실습에 사용할 완충용액을 제조해보고, 특정 완충용액의 pH를 측정한다.
- 전기영동방법의 원리와 특성을 이해하고 Calf thymus DNA를 agarose gel에 전기영동하여 농도별 band 모양을 관찰, 분석하고 DNA를 사이즈, 종류 별로 구별해본다.

실험 원리
- 완충용액
완충용액(buffer solution)이란, 산이나 염기가 약간 첨가되어도 pH가 거의 변하지 않는 용액을 말한다. 전형적으로 완충 용액은 약산과 그 짝염기를 대략 같은 농도로 섞어 만든다.

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실험 시약 및 실험 기구
1. 실험 시약
-buffer 제조 : Trizma base, Boric acid, EDTA, ddH2O
-전기영동 : Agarose, CT DNA, 10XBPES, 1XTBE buffer, Ethidium Bromide

<중 략>

Methods (실험 방법)
(1) Gel caster를 '실험 원리'에 나와 있는 방법에 따라 조립한다.
(2) 1% Agarose gel 제조
1. 삼각 플라스크에 유산지를 통해 1XTBE buffer 40ml을 넣는다.
2. 전자저울을 통해 Agarose 0.4g을 취하여 플라스크 속 TBE buffer에 넣는다.
3. parafilm으로 삼각 플라스크 입구를 막아주고 테이프 같은 비닐부분으로 완벽히 봉해준다.
그 후, 주사기로 뚜껑 부분에 구멍을 뚫어준다. (뚜껑을 만드는 이유는 용액이 끓어 넘침을 방 지하기 위함이며 구멍을 뚫는 이유는 폭발을 방지하기 위함이다.)
4. 전자레인지에 40초간 돌린다. 이는 일정온도 이상일 때 녹는 용액이므로 충분히 녹이기 위해서 이다. 또한 40초간 돌릴 때, 우선 30초를 돌린 후 5초를 쉬고 나머지 10초를 마저 돌린다.
5. 녹은 Agarose용액을 상온에서 잠시 식힌 후 gel caster에 붓고 comb를 꽂는다. 시간이 지남에 따라 굳으면서 홈이 생기게 되는데 추후 이 공간에 시약을 담는다.
6. Agarose gel을 굳힌다.(약 30분간 소요)

참고자료

· 기초생화학 제 2판 , 양철학 , 2007 , page 27~28
· Reginald H. Garrett, Charles M. Grisham, "BIOCHEMISTRY" 4th Ed., Brooks/cole cengage learning, 2008
· 옥스토비의 일반화학 제 6판(Principles of Modern Chemistry/6th Edition) , David W. Oxtoby, H.P.Gillis, Alan Cmapion , 2008 , page 733~738
· 완자 개념 학습서 화학II , 비유와 상징 , 2010 , page 11~14, 264
· 숨마쿠라우데 화학II , 김인섭 외 3인 , 2008 , page 406