Ligation, Transformation

소개

일반생물학/생물학 실험 A+ 레포트 입니다.

목차

1.실험목적
2.실험방법
3.실험결과
4.토의

본문내용

*Transformation (형질전환)

-Transformation(형질전환)이란 DNA를 bacteria 세포 내로 주입하는 과정박테리아의 유전자들은 순수한 DNA의 형태로 하나의 세포에서 다른 세포로 이동할 수 있다. 박테리아가 순수한 DNA를 환경으로부터 취해서 이 외부 DNA를 그 자신의 유전물질에 병합 시키는 이 과정을 transformation이라 한다.

-인공적으로 박테리아에 외부 DNA 조각을 주입하는, 인공적transformation은 주입하는 DNA가 자가 복제가 가능한 완전한 replicon일 때만 가능하다.

-Plasmid DNA나 완전한 viral DNA에 의한 transformation이 높은 효율로 일어나는 반면, 박테리아 DNA의 linear fragment 들에 의한transformation은 매우 낮은 효율로써 일어난다.

*Competent cell

-정상적인 bacteria에 화학적 처리를 하여 DNA가 잘 들어갈 수 있게 만든 cell을 의미.

-화학처리에 쓰이는 시약은 다음과 같이 여러가지가 있으며 이 중 가장 중요한 것은 calcium chloride이다.

<중 략>

이번실험은 heat shock를 이용하여 competent-cell을 transformation 시키는 것이었다.형질전환에 암피실린이 이용되었는데 이것은 항생제의 일종으로서antibiotics에 저항할 수 있는 유전자를 제공한다.
따라서 competent-cell이 제대로 형질전환이 이루어졌을 경우antibiotics가 들어있는 고체배지에서도 잘 자라서 콜로니를 형성했을 것이다.heat shock 과정에서 주의할점은 열을 가하기전에 competent-cell 은 저온 상태로 유지시켜야하는데 competent-cell을 옮기고 amp를 넣는과정에서 상온에 오랫동안 노출 시키면 안되는 것이다.

참고자료

· 없음