Competent cell 제조하기

목차

1. 실험 번호: 실험 주제
2. 실험 목적
3. 실험의 이론적 배경 및 주의사항
4. 시약 및 재료
5. 실험 방법
6. 결과 및 고찰
7. 참고문헌

본문내용

1. 실험 번호: 실험 주제
- 실험1. competent cell 만들기

2. 실험 목적
- 외부 DNA를 숙주세포 내로 도입하는 방법인 형질전환은 박테리아 세포에 물리적 또는 화학적 자극을 주어 plasmid DNA를 받아들일 수 있는 상태로 만들어, DNA가 세포 내로 들어가게 한 다음, 이들 형질전환된 세포들을 배양함으로써 이루어진다. 위 실험에서 필요한 competent cell, 즉 숙주세포가 외부 DNA를 받아들일 수 있는 상태의 세포를 만들기 위함이다.

3. 실험의 이론적 배경 및 주의사항
- 배경 :
① competent cell이란?
DNA를 삽입할 수 있도록 처리한 세포. 대부분은 대장균에 유전자를 도입할 때에 사용하는 균체의 뜻으로 사용한다. 대장균의 경우 칼슘용액으로 처리하는 방법과 루비듐용액을 사용하는 방법 등이 있다. 전자가 간편하지만 후자 쪽이 효율은 크다.

② 숙주세포란?
다른 미생물을 기생시켜서 영양을 공급하는 세포로 기억,특이성 및 비자기 인식을 가지고 있으며 그 반응이 특이하다. 비자기에만 발생하고 숙주 자신의 성분에 대해서는 면역반응을 일으키지 않는데 기억능력으로서 비자기로 일으킨 면역을 기억하며 다음에 동일한 항원에 대하여 면역성을 가지게 된다.

- 주의사항 :
① 멸균을 유지하는 것이 매우 중요하다.(모든 실험은 알코올램프 근처에서 실험)
② 세균들이 차갑게 유지될 수 있도록 얼음에 넣어 보관한다.
③ 원심분리기 이용 시, 시험관의 균형을 맞춰서 돌려야 한다.
④ 각 절차별 반응 시간은 최소시간이다.

참고자료

· [네이버 지식백과] 수용성 세포 [competent cell, 受容性細胞] (생명과학대사전, 2008.2.5., 아카데미서적)
· [네이버 지식백과] 숙주세포 [host cell, 宿主細胞] (두산백과)
· http://blog.naver.com/bsi1223?Redirect=Log&logNo=90097291696