순수배양 결과레포트

목차

1. Subject
2. Introduction
3. Theory & Principle
4. Apparatus & Reagents
5. Procedure
6. Results
7. Consideration
8. Reference books

본문내용

1. Subject
순수 배양
2. Introduction
공기 중과 토양 속에서 배양한 미생물을 순수 분리하는 방법과 세균의 형태와 크기, 배열 상태 등을 관찰할 수 있다.
Overlay을 통한 Bacillus subtilis(고초균), Enterrococcus faecalis(대변장구균), Escherichia coli(대장균)를 구분하여 순수 분리 및 배양할 수 있다.
균종의 stock을 제조한다.
3. Theory & Principle
세균(bacteria)
분열균문(分裂菌門 Schizomycophyta) 분열균강(分裂菌綱 Schizomycetes)에 속하며 거의 모든 환경에 존재하는 현미경적 크기의 생물.
종종 수많은 세균이 좁은 공간에 존재하는데, 예를 들어 영양분이 풍부한 1g의 정원 흙에는 수십 억의 세균이, 침 1방울에는 수백만의 세균이 살고 있다. 생물권에서 세균의 역할은 크다. 세균이 없는 토양에서는 식물이 자라지 못하고, 궁극적으로는 영양분을 식물에 의존하는 동물도 살 수가 없다. 일부 세균은 질병을 일으키지만 대부분은 무해하며, 사람에게 유익한 종류도 많이 있다.

<중 략>

① 배양액 1mL를 Streaking하고 1mL를 1.5mL Micro tube에 넣고 Centrifuge(8000rpm, 4℃, 3분)하고 10% glycerol롤 Stock을 만든다.
② 다음 실험 시간에 순수 배양을 잘 했는지 염색법을 이용하여 현미경 관찰한다.
-Stock 제조 과정-
<그림1. Centrifuge한 것> <그림2. 배양액을 버린 것> <그림3. 10% Glycerol을 넣고 현탁한 사진>
① 균1, 균2, 균3 (균 하나당 2개씩, 총 6개)를 1mL씩 1.5mL Micro Tube에 첨가한 것을 Centrifuge(8000rpm, 4℃, 5분)한다. (그림1) ② Centrifuge한 것을 <그림 2>와 같이 배양액을 버린다.
③ 배양액을 버리고 10% Glycerol 1mL를 넣고 현탁시킨다.
④ -80℃ Deep freezer(초저온 냉동고)에 보관한다.
<참고>
6. Results
<첫째 날 결과>
<사진 설명>
10-2의 희석액을 10-6 로 희석한다.
희석액 (6)을 150㎕ 채취하여 도말 평판법(spreading) 또는 500㎕로 overlay를 시행한다.
배지에 도포한 배양액이 다 마르면 뒤집어서 37℃ Incubator에 배양한다.
약 24시간 후에 배양된 균의 옳은 예이다.
1. Bacillus Subtilis(고초균)
2. Escherichia coli(대장균)
3. Enterrococcus faecalis(대변장구균)
위 3가지 균을 각각 둘째 날 실험 과정을 거쳐 액체 배지에 배양하였다.

참고자료

· Encyclopedia BRITANNICA '세균~세균의 특징'
· 서정운(1993), 공업미생물학, 형설출판사
· 정동효(1993), 발효와 미생물공학, 선진문화사
· 이건섭(1993), 진단병원미생물학, 고려의학
· 이시카와 외, 정동효 역(1993), 도해미생물학핸드북, 지성의 샘
· 홍순우·박계인·이영록(1993), 기초·응용미생물학, 광림사
· 대한미생물학회(1991), 의학미생물학, 여문각
· 에코 미크로, 손영수 역(1988), 소사전-미생물의 수첩, 전파과학사
· S. Baron(1991), Medical Biology, 3rd ed, Churchill Livingstone
· 한국생물과학협회(1984), 생물학사전, 교문사
· 박상규, 미생물학 강의노트 '순수배양의 정의~여과에 의한 멸균법'
· 민경희(1998), 대학미생물학, 탐구당
· Joanne M. Willey, Linda M. Sherwood, CHRISTOPHER J. WOOLVERTON 저, 김영민, -경민, 박만성 역(2012), 일반미생물학, 라이프사이언스
· 이재열(1997), 보이지 않는 권력자, 라이프사이언스
· 김선희, 김영자, 김석홍 외 4명(2003), 미생물학 실습, 고려의학, p.79
· HANBAEK Science Technology, http://hanbaeksci.co.kr/goods_detail.php?goodsIdx=235
· DAIHAN Science, http://daihanscience.koreasme.com/viewproduct_20007_k.html
· 송화정, '대한과학, 생명과학용 초저온냉동고 유럽시장 진출', 2011.11.15, 2013.04.05,
· http://www.asiae.co.kr/news/view.htm?idxno=2011111509492658914