생물화학공학실험 Transformation

목차

1. Abstract
2. Experiment
3. Result
4. Discussion

본문내용

1. Abstract
재조합된 DNA(eGFP)를 competent cell에 넣고, 생성된 colony를 통해 형질전환에 관하여 고찰하여 보는 실험이었다.

<중 략>

BL21( E.coli competent cell )
E.coli를 시약을 써서 charge를 바꾸어 plasmid DNA를 쉽게 안으로 들어올 수 있게 만든 것으로 원래는 서로 같은 charge를 띠어 척력이 발생하지만 칼슘이나 루비듐이온을 이용하여 세포막의 charge를 변화시킨다.
LB배지( Yeast extract, NaCl, Tryptone )
E.coli를 잘 배양할 수 있도록 양분을 공급함. 구성성분으로는 tryptone(질소공급원), Yeast Extract(생장에 필요한 영양소 효모를 갈아만든 것), NaCl(삼투압조절), Agarose(고체배지 만들 때 첨가)
Incubator
일정온도를 유지하여 배양 할 수 있도록 함(37)
Ampicillin
일종의 항생제로서 eGFP는 항생제에 내성을 가지고 있기 때문에 죽지 않고 나머지 불필요 한 것들을 없애는 역할이다.

<중 략>

4. Discussion
이번실험은 Restriction 단계에서 잘라낸 DNA를 E.coli competent cell에 넣어 생성된 colony를 통해 형질전환에 관하여 고찰하여 보는 실험이었다.
일단 대조군과 실험군을 비교하여 보면 기포 같은 것이 15개정도 보였다. plasmid DNA를 운반(벡터현상)을 통하여 recombinant DNA가 생성되고 이를 배지에 키워 결과물을 얻을 수 있었다. 유전자를 증폭시키는 방법 중 이번 실험은 균을 이용하여 증폭시키는 방법이다. 균을 이용하여 유전자를 증폭시키는 것은 error가 적다는 장점이 있으나 결과가 나오기까지 상당히 오랜 시간이 걸린다. 2번째 실험인 PCR은 상당히 빠른 시간 안에 유전자를 대량으로 증폭시킬 수 있지만 error가 많은 단점이 있었다.

참고자료

· 없음