[화학생물학실험 예비레포트 및 결과레포트] Plasmid DNA Mini Preparation

목차

1. 실험제목

2. 실험 목적

3. 시약 및 기구

4. 실험 이론
1) Plasmid DNA의 추출 및 정제
2) Alkaline Lysis Mini Preparation

5. 주의사항

6. 실험방법

7. 실험결과

8. 고찰

9. 참고문헌

본문내용

1. 시약
1) LB medium
2) Solution 1 Buffer (Resuspension Buffer)
① Tris-Cl: pH를 유지하는 역할.
② EDTA [C10H16N2O8, MW 292.24 g/mol, D 0.860 g/cm3].
: 킬레이트로 작용해 세포벽의 안정성을 유지하는 Ca2+을 제거, 세포벽 파괴를 돕는다.
※ 눈 자극 유발. 장기간 또는 반복노출 시 신체와 수생생물에 유독. 고온에서 분해 시 자극성, 독성 가스 발생.
③ RNase: RNA를 파괴해 실험 target인 플라스미드 DNA만을 얻을 수 있게 해준다.
④ Glucose: 삼투압을 유지해 세포가 터지지 않도록 한다.
3) Solution 2 Buffer (Lysis Buffer)
① NaOH: pH를 상승시켜 gDNA denaturation을 유발, 두 가닥으로 갈라지게 한다. 갈라진 상태에서도 supercoil 상태로 가닥이 완전히 분리되지는 않기 때문에 circular DNA로 renaturation 될 수 있다.

참고 자료

http://msds.kosha.or.kr/MSDSInfo/kcic/msdsdetail.do (안전보건공단 화학물질정보, 안전보건공단, 방문일: 2021. 10. 23.)
https://terms.naver.com/entry.naver?docId=5894586&cid=61232&categoryId=61232 (한국미생물학회, 미생물학백과, 네이버 지식백과, 방문일: 2021. 10. 23.)
https://askabiologist.asu.edu/alkaline-lysis (Ask A Biologist, School of Life Science in Arizona State University, 방문일 2021. 10. 23.)