일반세포배양의 방법

목차

Ⅰ.서론

Ⅱ. 정상세포의 일반적인 배양법
1. Primary culture(=초대배양
2. Monolayer culture’s method
3. Cell에서의 작업 2가지
4. 배양용기

Ⅲ. 계대배양(=Subculture)과 방법
1. 접착세포의 계대법
2. 접착세포의 Trypsin 처리

Ⅳ. 수립세포주
1. 부유세포의 계대법

Ⅴ. 세포수 계산법
1. 계산 장치의 측정원리
2. 전 세포수의 계산
3. 생세포수의 계산

Ⅵ. 결론

Ⅶ. 참고문헌

본문내용

서론
동물 세포배양에서 수명이 한정된 정상세포(normal cell)는 20~30회의 분열 후에 증식능력을 잃고 사멸한다. 정상세포는 분열횟수가 증가함에 따라 노화하고, 세포의 성질이 시간경과에 따라 변화하여 간다. 이러한 계에서는 세포의 계대수를 정확하게 파악하고, 실험할 때에는 세포의 계대수를 맞추어 행하지 않으면, 재현성이 나타나지 않는 경우가 있다. 그리하여 정상세포를 실험에 이용하려고 할 때에는 먼저 대량으로 세포를 배양하고, 다수의 동결 스톡을 만들어서 정기적으로 세포를 해동하여 일정한 계대를 거쳐 세포를 실험에 제공하는 것이 필요하다. Primary culture(=초대배양)은 배양형태나 배양방법이 정상세포와 비슷하다. 여기서 1. 정상세포는 바닥의 표면에 접착을 해야만 자라기 때문에 절대 겹쳐서 자라지 않고 단층(=monolayer)으로 자라는 접착의존성(anchorage dependence)을 가진다.(=단층배양) 2. 암세포는 바닥에서 부착하지 않고 이중, 삼중으로 겹쳐서 자란다.(=부유배양) 정상세포의 배양성질은 동물세포 배양의 특징과 같으며, 증식인자 의존성으로 DNA가 이동한다. 정상세포의 특징은 1. 매우 다양한 세포가 모여 있고, 배양액 수가 지남에 따라 세포의 종류가 선별되어진다. 즉, 빨리 자라는 세포가 늦게 자라는 세포를 덮어버린다. 2. 동일한 유전자를 가진 세포의 집단인 cell clone이 불가능하다 여기서 복제동물을 clone animal이라고 한다. 세포배양에 중요한 것이 세포의 부착 면적의 확보와 세포를 어떻게 바닥에 부착을 시키는가 하는 것이 중요하다.

참고자료

· 박흠대 교수님 세포배양공학 필기노트
· 박흠대 교수님 세포배양공학 강의내용
· 백문기, 암유전자, 월드사이언스, 2000, pp.32-53
· 야마모또 타다시, 키워드로 이해하는 세포신호전달 일러스트맵, 월드사이언스, 2006, pp.49-78
· 김승업, 세포배양 하나부터 열까지 알아보기, 자유아카데미, 2008, pp.73-119
· 이한웅, 분자 세포 생물학, 월드사이언스, 2011, pp. 628-634