제한효소 (Restriction enzyme,제한효소 분류,제한효소 종류,제한효소 보관방법,restriction endonuclease,DNA 절단)

소개

제한효소의 분류, 정의, 실험시 발생할 수 있는 문제점에 대한 해결방법등을 정리한 자료입니다.

목차

1. 제한효소 (Restriction Enzyme) 이란
2. 제한효소 특징
3. 제한효소의 분류
4. 제한효소 종류
5. 제한효소 보관방법
6. 제한효소와 실험관련 질문사항
7. 효소반응시 문제점과 해결방안
참고자료

본문내용

□ 제한효소 (Restriction Enzyme) 이란?
제한 효소는 세균의 세포 속에서 외부에서 들어온 DNA를 절단하여 병원체를 없애는 역할을 한다. 제한 효소는 메틸기가 도입된 자기유전자와 메틸기가 없거나 또는 메틸화 패턴이 다른 외래유전자를 정확히 구분하여 절단함으로써 외래유전자를 제거한다. 세균은 제한 효소의 이런 성질을 이용해 박테리오파지 또는 파지라고 부르는 세균성 바이러스로부터 자신을 방어한다. 즉 박테리오파지는 자신의 DNA를 세균의 세포 속에 집어넣어 복제하는데, 제한 효소는 이 박테리오파지의 DNA를 많은 조각으로 자름으로써 복제되는 것을 막는다. 제한 효소라는 이름은 세균에 감염할 수 있는 박테리오파지의 종류를 제한하는 능력 때문에 붙여졌다.

<중 략>

□ 제한효소와 실험관련 질문사항
1. 제한효소에서 Unit은 어떻게 결정하는가?
제한효소는 1μg의 DNA를 정해진 조건에서 1시간 동안 자르는 양으로 1unit을 결정 한다. 보통은 lambda DNA를 기질로 이용한다.
2. Isoschizomer와 compatible end는 무엇이며 차이가 어떤것인가?
기원이 다르고 이름은 다르지만 같은 제한서열을 갖는 효소를 isoschizomer 라고 한다. Hinc II와 Hind II는 유전자상에서도 같은효소 이지만, 기원이 다른경 우이고, Mbo I과Dpn II, Sau3A I은 유전자도 다르고 기원도 다르지만 같은 인식자리와 같은 제한자리를 갖은 대표적인 isoschizomer이다.
Compatible end를 갖는다는 의미는 완전히 다른 제한효소이지만, 절단 후 절단부위가100% 일치하여 ligation 될 수 있는 경우를 말한다. 예를들어 설명하면, BamH I, Bgl II, Mbo I은 각각 GGATCC, AGATCT, GATC의 제한자리를 인식하지만, 절단부위는 모두GATC이므로 이 세종류의 enzyme으로 처리하여 절단한 DNA는 모두ligation이 가능하다.

참고자료

· 제한효소 [restriction endonuclease, 制限酵素]/다음 백과사전
· CUT-PROOFRestriction Enzymes/엘피스 바이오텍