조직배양

목차

Ⅰ. 실험방법 및 재료
Ⅱ. 결과
Ⅲ. 고찰

본문내용

● 실험방법 및 재료
실험1] 배지 만들기
준비물: MS배지 powder, sucrose, 한천, 옥신, D.W., 메스실린더, 500ml병, petri dish, 인디케이터
실험방법
1. 비커에 300ml D.W.에 MS배지 4.4g 과 sucrose 10g을 넣고 잘 섞어준다.
2. 메스실린더에 옮긴 후 500ml 까지 D.W. 넣어준다.
3. 500ml병에 옮긴 후 한천 4g을 넣고 잘 섞어준다.
4. 병뚜껑에 인디케이터를 부착한 후 autoclave를 이용하여 121℃에서 15분간 멸균한다.
5. 0.1mg/ℓ의 옥신 농도를 만들기 위해 5㎕의 옥신을 넣은 후 petri dish에 분주한 후 굳힌다.

실험2] 당근 조직과 담배 잎, 담배 종자 배양하기
준비물: 당근, 담배 잎, 담배 무균 종자, 칼, 핀셋, 3M paper, falcon tube, EtOH, 4% 락스, 증류수, 멸균수, 마이크로피펫
실험2-1] 당근 조직과 담배 잎 배양
실험방법
1. 깨끗하게 당근을 씻고 2cmX2cm 정도의 적당한 크기로 자른다.
2. 증류수로 씻고 70% EtOH에 10초간 담근다.
3. 4% 락스에서 5분간 살균 하고 멸균수로 washing 하는 것을 3회 반복한다.
4. 멸균수에 넣은 채로 clean bench에서 핀셋과 매스를 이용하여 0.5cmX0.5cm 으로 자른다.
5. 3M paper에서 물기를 제거 후 각 배지(옥신 첨가, 옥신+시토키닌 첨가)에 치상한다.
(한 배지 당 당근조직 2개, 담배 잎 2개)

실험2-2] 담배 종자 배양
실험방법
1. 10개의 담배종자가 들어있는 tube에 70% EtOH를 넣고 10초 후 EtOH를 제거한다.
2. 종자에 4% 락스를 넣고 2분간 살균한다.

참고자료

· 청수 석 외 2인, 『식물조직배양입문』, 박해준 역, (성안당), 8~14p, 50~53p
· 고재풍수, 『식물조직배양의 신단계』, 조만현 역, (월드사이언스), 37~39p
· 심웅섭, 『식물분자생리학』 (월드사이언스), 273~286p
· http://peanutl.blog.me/130180330863 - [식물조직배양 및 실험] 당근 Callus, Shoot 유도 실험