mini prep
- 최초 등록일
- 2012.12.25
- 최종 저작일
- 2012.06
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소개글
자세한 설명과 꼼꼼한 discussion으로 A+ 받은 실험보고서 입니다.
목차
1. 실험 결과
2. 토의
3. Further Study (Electrophoresis)
4. 참고문헌
본문내용
1. 실험 결과
다음은 각 조의 실험 결과이다. 내가 속한 조의 경우 다른 세 조와 달리, 어떠한 band 형태도 나타나지 않는 것을 볼 수 있다. 이는 plasmid DNA가 분리되지 않았거나, 분리되었다 하더라도 그 농도가 매우 낮아서 band의 형태를 관찰하기 어려운 것이라고 할 수 있다. 그렇기 때문에 다른 세 조의 실험 결과도 보다 구체적으로 살펴보도록 하겠다.
1조(Lane 1)의 경우에는 band가 선명한 형태로 형성되었음을 알 수 있다. 그것이 두 개의 band인지는 확실하지 않아 보인다. 그러나 10Kbp에 희미한 band가 있는 것처럼 보이기도 한다. 분리된 plasmid DNA의 크기는 8Kbp이다. 즉 이 DNA는 8000개의 염기쌍으로 이루어져 있음을 알 수 있다. 또 만약 그 위의 희미한 band가 실제하는 것이라면 해당하는 DNA는 약 10Kbp의 크기라고 할 수 있다.
<중 략>
앞서 nucleic acid 분리를 위한 electrophoresis를 공부했다면, 다음으로 protein 분리를 위한 electrophoresis를 살펴보자. protein의 경우에는 agaros가 사용되기도 하지만, 가장 흔한 electroporesis 지지체는 polyacrylamide다. polyacrylamide gel을 준비할 때에는, nucleic acid 분리 때와 마찬가지로 교차결합 되어있는 얇은 판 형태로 주형을 떠서 만든다. 이 때 protein 시료를 gel에 걸기 전에 소듐 도데실 황산(sodium dodecyl sulfate, SDS)로 처리한다. SDS의 구조식은 이다. 이 것의 음이온은 비특이적으로 흡착되면서 protein에 강하게 결합한다. protein이 클수록 더 많은 음이온이 protein에 흡착되어 붙는다. 시료의 모든 protein들은 음이온인 와 흡착되어서 음전하를 갖고 있다. 또한 preotein들은 대략적으로 모두 같은 모양의 코일 형태로 되어있다. SDS-polyacrylamide-gel electrophoresis의 경우 작은 분자보다 큰 분자가 acrylamide에 더 저항력이 크다. 시료 내의 모든 protein들은 그 모양이나 전하가 거의 같으므로, protein의 크기가 분리의 결정요인이 된다. protein의 경우 SDS가 없는 poluacrylamide 상에서도 분리 가능하다. 이런 경우의 gel을 native gel이라고 한다.
참고 자료
Campbell Biology 8th
Mary K. Campbell Biochemistry(6th)
http://www.google.co.kr/#sclient=psy-ab&hl=ko&newwindow=1&biw=1024&bih=408&q=base+pair+nucleotide&oq=base+pair
http://kin.naver.com/qna/detail.nhn?d1id=11&dirId=1116&docId=52031204&qb=ZGVuYXR1cmUg7Yis66qF&enc=utf8§ion=kin&rank=2&search_sort=0&spq=0
http://www.serepie.com/bs/trwnsgsnic.html