Realtime pcr(RT PCR)의 원리와 방법 및 종류, 응용

소개

Real-time PCR의 원리와
4가지 종류 (Interchelating법, TaqMan probe법, Molecular beacon법, Cycling probe법)
그리고 Real-Time PCR의 응용과 전망에 대한 레포트 자료 입니다.

목차

1. Real-time PCR이란?
2. Real-time PCR의 원리
3. Interchelating법
4. TaqMan probe법
5. Molecular beacon법
6. Cycling probe법
7. Real-Time PCR의 응용과 전망

본문내용

Ⅰ. Real-Time PCR

Real-time PCR은 1992년 도입되어 생명공학에 이용되기 시작하였다. 이 기술은 잘 알려져 있는 PCR 기법을 개량한 것이다. PCR은 적은 양의 시료를 대량으로 증폭이 가능하다는 장점 때문에 clonning과 sequencing 등의 기본기술로 응용되었다. 하지만 기존의 PCR은 핵산이 기하급수적으로 복제되기 때문에 초기에 존재하였던 핵산의 양을 파악하기 어려웠다. Real-time PCR은 실시간으로 증폭산물의 정량을 정확하게 분석할 수 있는 기술로서 발생하는 증폭 산물의 증가를 실시간으로 모니터링 하여 분석할 수 있다. 이 기술은 PCR에서 사용되는 전기영동 과정이 필요 없기 때문에 더 신속하고 편리한 측정이 가능하다. 또한 오염의 위험성도 줄일 수 있는 장점을 가지고 있다.

<중 략>

사회적으로 문제가 되고 있는 유전자조작식품(GMO)도 Real-Time PCR을 통해 유전자의 함량을 분석 할 수 있다. 먼저 GMO 유전자와 상보적으로 결합할 수 있는 probe를 이용하여 여러 기지농도의 GMO 표준시료와 미지시료를 동시에 Real-Time PCR을 실시하게 된다. 아래와 같은 검출곡선을 볼 수 있는데 왼쪽의 곡선의 시료가 GMO 유전자 함량이 가장 큰 것이며 오른 쪽으로 갈수록 유전자 함량이 작은 곡선이다. 형광의 증가를 보이지 않는 바닥에 있는 선은 음성표준시료로서의 증류수나 Non-GMO 시료가 보여주는 선이다. 미지의 시료가 나타내는 곡선을 비교하면 미지시료의 포함된 GMO 유전자의 함량을 얻을 수 있다.

참고자료

· 생물학 연구 정보센터 BioWave vol.9
· 재미있는 분자생물학 그림여행 [유욱준 2007]
· 분자생물학 : 유전혁명의 이해 [Clark, David P. 2006]
· http://cafe.naver.com/takarapcr.cafe?iframe_url=/ArticleRead.nhn%3Farticleid=25
· http://www.ilm.pf/PCRtempsreel
· http://bitesizebio.com/2009/09/04/qpcr-plexor-vs-hydrolysis-probes/
· http://www.gene-quantification.de/chemistry.html#taqman
· http://bric.postech.ac.kr/myboard/read.php?Board=review0&id=1729
· http://www.oxoidkorea.com/product/appliedbiosys.html
· http://www.agros.go.kr/jsp/mti/agadm_userweb/bbs/view.jsp?bbs_id=002&bbs_seq=6547
· http://www.molecular-beacons.com/PA_design6 - 6.html