ligation & transformation

소개

ligation & transformation 조사입니다.

목차

없음

본문내용

Plasmid vector의 장점
1. 복제기점(origin of replication)을 갖기 때문에 증식할 수 있다
2. 항생제 내성 유전자 (antibiotic resistance gene)
을 가져 selection marker로 사용될 수 있다
3. Multi cloning site(MCS)가
존재하여 원하는 유전자를 끼워 넣을 수 있다

제한효소(Restriction endonucleases)?
특성에 따라 Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ형 제한효소로
분류한다
DNA의 특정한 염기배열을 식별하고, 이중사슬 구조에서 nucleotide가 연결된 phosphodiester bond (인산-디에스테르 결합)를 절단하는 핵산분해 효소의 하나이다
Ⅰ형 (Type Ⅰ) : 제한효소와 메틸화효소가 뭉쳐져 있고, 인식자리와 제한자리가 서로 다르다. 염기서열은 특이적으로 인식하지만, 인식자리에서 약 1000개 염기 정도 떨어진 곳에서 비특이적으로 DNA를 자른다
Ⅱ형 (Type Ⅱ) : 인식자리가 특이적이고 제한자리 또한 주변의 염기로 특이적으로 작용한다. 실험실에서 주로 사용하는 것이 이 Ⅱ형이다. Ⅱ형 안에는 연관성이 낮은 여러 가지 제한효소가 섞여 있어서, 8개형으로 세분하여 분류한다(orthodox Ⅱ형, ⅡS형 등)
Ⅲ형 (Type Ⅲ) : Ⅰ형과 마찬가지로, 제한효소와 메틸화효소가 합쳐져 있다. 효소 활성에 ATP가 꼭 필요하고, 완전 절단이 거의 일어나지 않는 특징이 있다. DNA를 자르기 위해서는 DNA 분자 반대 방향으로 놓여 있는 또 다른 인식 염기서열이 있어야 한다.

대표적인 Ⅱ형 제한효소의 인식염기배열과 절단위치
AluI and HaeIII produce “Blunt ends”
BamHI, HindIII and EcoRI produce “Sticky ends”

참고자료

· 없음