(식물생리학) spectrophotometer이용 엽록소 함량 측정

소개

A학점 받은 식물생리학 실험 레포트 입니다.

목차

Ⅰ. Introduction
Ⅱ. Materials
Ⅲ. Methods
Ⅳ. Result
Ⅴ. Discussion

본문내용

Ⅴ. Discussion
이번 실험은 spectrophotometer를 이용하여, 시금치와 상추의 O.D.를 측정하여 chl a와 chl b의 농도를 구하고 전체 엽록소의 농도와 실제 앞 단위 g당 엽록소의 함량을 알아보는 실험이었다.
우선 우리조의 경우 시금치를 가지고 실험을 하고 상추로 실험을 한 1조와 결과를 교환하여 결과처리를 하도록 하였다. 먼저 과정 중에 80% acetone과 시금치를 넣어 막자사발에서 곱게 갈아야 하는데, acetone은 휘발성이 크므로 신속하게 실험을 진행해야 하였다. 엽록소 분자는 중앙의 마그네슘 원자가 질소를 포함하는 포르피린 고리로 둘러싸여 있는데 이 고리에는 피톨 사슬(phytol chain)이라는 탄소와 수소로 된 긴 곁사슬이 달려 있다. 이 꼬리 부분의 친유성으로 인해 막에 쉽게 부착해 복합상태로 존재하는데, 이 꼬리 부분의 친유성기를 유기용매로 녹여 막으로 분리하는 것이다. 또한 엽록소가 낮은 온도일수록 유지하기 좋기 때문에 사발에 갈면서 발생하는 열도 유의해야 하므로 빠른 실험 진행이 필요하였다.
이렇게 유발에 곱게 간 sample은 조금도 sarl지 않고 깨끗이 다 넣어주어야 한다. 이 sample을 centrifuge에 넣어 2700rpmd에서 5분간 centrifuge 시키면 pellet과 상층액으로 분리되는데 여기서 상층액만 tube로 옮긴 후 pellet에 80% acetone 4ml를 넣고 voltexing 후, 다시 centrifuge 시켰다. 이것은 또 pellet과 상층액으로 분리되는데 여기에서도 상층액만을 분리하여 앞에서 추출한 상등액과 섞어 주었다.
두 상층액을 섞은 extract의 부피를 측정하니 10.5ml가 나왔는데, 이 중 3ml만을 취하여 80% acetone 12ml를 넣어 5배로 희석시킨다. 이 extract를 잘 흔든 후, 645nm, 652nm, 663nm에서 각 sample의 O.D.값을 측정하였다.

참고자료

· 최주환/기기분석개론 및 응용/교보문고/1998
· 이문득/기기분석화학/자유아카데미/1991
· Daniel C Harris/분석화학/자유아카데미/1997
· 심웅섭/식물분자생리학/월드사이언스/1999