(세포생물학) DNA 전기영동

소개

세포생물학 실험레포트 입니다.

목차

Ⅰ. Introduction
Ⅱ. Materials
Ⅲ. Method
Ⅳ. Result
Ⅴ. Discussion

본문내용

Ⅰ. Introduction
물질 중에는 전기적으로 중성인 것도 있지만 전체적으로 (+)전기를 띄고 있거나 (-)전기를 띄고 있는 물질들도 많이 있다. 대표적인 예가 핵산인데 DNA나 RNA를 말하며 이들은 전기적으로 (-)전하를 가진다. 한편 agarose를 gel화 시키면 전기적으로 중성인 망상구조를 가진 말랑말랑 하지만 상당히 탄탄한 상태로 바뀌는데 이 망상구조는 스펀지처럼 미세한 구멍들이 서로 통해있어서 이 구멍의 크기보다 작은 물질은 어떤 힘을 걸어줄 때 일정 속도로 그 구멍을 통과하여 이동하게 된다.
이 agarose gel을 전기가 통하는 buffer에 담가 놓고 한 쪽에 홈을 파서 핵산의 용액을 넣어준 후 길이 방향으로 전기를 흘려주면 핵산은 (-)극 쪽에서 밀려 (+)극 쪽으로 이동하게 되는데 이 때 agarose gel의 망상구조는 이 흐름에 저항으로 작용한다. 따라서 상대적으로 작은 길이의 핵산의 조각들은 상대적으로 빠른 속도로 (+)극 쪽으로 이동하며 길이가 긴 조각들은 상대적으로 느린 속도로 같은 방향으로 움직인다. 이 때 같은 길이를 가진 조각들은 거의 동일한 속도로 움직이기 때문에 홈의 모양과 같은 형태의 띠를 형성하게 된다.

이런 원리를 이용하여 핵산(또는 단백질이나 기타 전기를 띈 분자들)을 크기별로 분리하여 특정 크기(길이)를 가진 특정부분의 핵산 단편의 유무를 확인하거나 그 크기를 모르는 핵산 절편의 길이를 가늠할 때 agarose gel과 전기장치를 이용하여 위의 방법을 사용하게 되는데 이런 방식의 분석 방법을 전기영동(Electrophoresis)라고 한다.

* agarose gel 전기영동
시판되는 agarose는 완전히 순수 분리된 것은 아니며 다른 다당류나 염, 단백질 등이 혼합되어 있으며, 이런 물질들이 포함된 정도에 따라 전기영동 시 DNA가 이동되는 정도나 DNA가 gel에서 분리되는 정도가 달라진다. 따라서 효소 억제제와 nuclease가 함유되어 있지 않으며 ethidium bromide로 염색할 경우 형광의 배경을 극소로 하기 위한 특별히

참고자료

· http://biochemistry.yonsei.ac.kr/biochem_molecular/gene_cloning_11.php
· http://biochemistry.yonsei.ac.kr/biochem_molecular/gene_cloning_20.php
· 정동효 편저/유전공학/학연사/1987/p.113-115