[생물학실험보고서]Streptomyces coelicolor 로부터 항생제 Actinorhodin을 검출

소개

Production, Isolation and partial purification of Actinorhodin from Streptomyces coelicolor 라는 주제로 서울대학교 생물학 실험 시간에 수행한 실험에 대한 실험보고서
(조교님께서 과정은 생략하라고 하신 관계로 보고서가 result와 discussion으로만 구성되니 참고하세요)

목차

Ⅰ. Result
Ⅱ. Discussion
Ⅱ.1 항생제 내성 기전 - 효소에 의한 항생제의 불활성화
Ⅱ.2 항생제 내성 기전 - 세포막의 항생제 투과성 변화
Ⅲ. Reference

본문내용

Ⅰ. Result
Ⅰ.1 plate 관찰
[그림1] 셀로판을 깔아 배양한 큰 정사각 plate(좌),
셀로판을 깔지 않은 작은 원형 plate(우)
일주일 동한 배양한 결과, 큰 plate에서는 Streptomyces coelicolor가 흰색으로 배지 전체를 덮었다. 셀로판지가 접혀 볼록 올라온 부분은 잘 펴진 다른 부분과 비교해 균 밀도가 다를 것으로 예상했으나, 실제로 눈에 보이는 밀도 차이는 없었다. 배지에는 검푸른색의 방울이 맺혀있었는데, 이것이 바로 실험에서 얻고자 한 Actinorhodin으로서 작은 배지에서는 배지에 흡수되어 배지 전체를 푸른색으로 물들였다. 특히 작은 배지에서는 검정색의 점들이 보였는데, 이것은 포자일 것으로 예상하였다. 사진으로는 분간이 어렵지만 두 개의 배지 모두 가장자리에서 붉은 빛의 물질들이 발견되었는데 이것은 다른 종류의 antibiotics인 undecylprodigiosin일 것으로 예상된다. 배지 가장자리는 다른 부분에 비해 섭취할 수 있는 양분이 제한적이기 때문에 환경적 차이에 의해 다른 antibiotics가 형성된 것으로 보인다.
Ⅰ-2 Actinorhodon 확인
plate에서 모은 방울들을 여러 단계에 거쳐 처리한 후 spectrophotometer로 확인한 결과 actinorhodin의 최대 흡수파장인 542nm 부근에서 peak가 나타났다(그림2). 따라서 plate에서 모은 남색 방울들이 actinorhodin이라고 확신할 수 있다. 그러나 흡광도 값이 너무 작게 나온 것을 보아 농도가 높은 편은 아닌 것 같다. 실험에서 plate마다 actinorhodin 색깔의 진하기가 달랐는데, 각각의 plate에서 얻은 액체의 흡광도를 따로 측정하여 농도를 비교할 수 있으나, 본 실험에서는 한꺼번에 모아 측정하였고, standard curve가 없는 상태이므로 농도를 정확히 알기는 어렵다. [그림2] 흡광도 측정 결과

참고자료

· - 서울대학교 의과대학 미생물학교실, <<핵심 병원 미생물학>>, 서울대학교출판부,p.p 188-190 (2006)
· - 이연희(2002), <<항생제 내성 기전>> , 미생물과 산업 Vol. 28, No. 2 (2002), pp 29-32
· - Henry H. Lee, Michael N. Molla, Charles R. Cantor & James J. Collins, <>, Nature Vol 467, 2 September (2010)