가수분해도 (Degree of Hydrolysis:DH) 측정

소개

가수분해도 (Degree of Hydrolysis:DH) 측정 기능성 실험 보고서입니다.
사진, 표, 관련논문 기재

목차

1. 실험제목
2. 실험원리
3. 실험재료및기구
4. 실험결과및고찰
5. 참고문헌

본문내용

실 험 제 목
가수분해도 (Degree of Hydrolysis:DH) 측정
실 험 원 리
- 단백질 용액이 단백분해효소에 의하여 가수분해된 정도를 전체 단백질량에 대한 수용성 단백질량의 증가비율에 의하여 가수분해도를 측정한다.
- Lowry법
: Folin-Ciocalteu의 phenol 시약을 tyrosine, tryptophan, cystein 잔기에 의해 환원정색시키는 반응을 기본으로 하여, 여기에 Biuret법의 원리를 조합시킨 정량방법으로 미량의 단백질을 정확하고 간편하게 정량할 수 있다.
실 험 재 료
및 기 구
· 시료 : 10% SPI 용액(supro 500E)
· 시약
- 알칼리성 구리시약 : 2% 주석산나트륨 수용액 1ml와 1% CuSO4·H2O 수 용액 1ml를 혼합한 후 2% Na2CO3 0.1N-NaOH 용액으로 100ml로 희석 한다. (불안정하므로 시험 당일 조제하여 사용한다)
- 1N folin 시약, 20% TCA(trichloroacetic acid)
· 효소 :
flavourzyme(최적 pH : 6.0, 최적 온도 : 50℃, 불활성 특성 : 80℃에서 10분간)
· 기구 : 시험관, 원심분리기, 분광광도계
실 험 방 법
(1) 10% SPI 용액을 만들어 삼각플라스크에 1ml를 취하고 99ml 증류수를 첨가하여 자석교반기로 잘 교반시켜 분산한 후 Lowry법에 의해 O.D.를 측정하여 전체 단백질 함량을 구한다. → A
(2) 10% SPI 용액 200ml를 각 효소의 최적 pH로 조절한 다음 각 효소의 최적 온도인 50℃에서 0.5% neutrase 또는 0.5% flavourzyme을 첨가하여 잘 저어주면서 각 조별 실험 시간에 따라 효소처리한다.
(3) 효소처리가 끝나면 즉시 끓는 물에서 가열하여 용액의 내부온도 85℃에서 5분간 또는 80℃에서 10분간 끓여 효소를 불활성화시킨다.
(4) (3)에서 1ml를 삼각플라스크에 취하고 99ml 증류수를 첨가하여 자석교반기로 잘 교반시켜

참고자료

· - 녹두의 가수분해조건에 따른 특성 변화. 구영아, 장세영, 박난영, 문채련, 김옥미, 정용진. Korean J. Food Preserv. Vol. 13, No. 5. pp. 563-568, October 2006.
· - 전두유의 가수분해조건에 따른 이화학적 특성 변화. 장세영, 구영아, 박난영, 김인선, 정용진. Korean J. Food Preserv. Vol. 14, No. 4. pp. 394-399, August 2007.