[식물생리학실험]2-3.엽록체 색소분리 및 특성과 광합성색소의 스펙트라

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Exp 2-3. 엽록체 색소분리 및 특성과
광합성색소의 스펙트라
1. Abstract
시금치 안에 들어있는 색소를 이동상과 전기상의 상태에서의 흡착성을 이용한 크로마토그래피법을 이용하여 색소를 추출하고, 이렇게 추출한 색소들을 흡수 스펙트럼을 측정해봄으로써 어떤 파장의 빛을 흡수하여 에너지로 이용하는지, 흡수하는 파장에 의해 어떠한 색을 흡수하는지 알아보는 실험이다.
먼저 설탕 파우더를 이용하여 컬럼을 만들고, 시금치를 갈아서 색소 원액을 추출한다. 시금치에서 추출한 색소를 컬럼을 통해 크로마토그래피법을 이용하여 분리한다. 그 후 추출한 색소를 각각 400~700nm의 파장에서 25nm의 파장을 간격을 두고 흡수 스펙트럼의 값을 구한다. 이때 색소를 추출할 때 사용한 용매를 이용해서 control을 잡도록 하며, 똑같은 색소의 흡광도를 측정해도 오차가 발생하기 때문에 각 파장마다 2번씩 측정해서 오차율을 줄여주도록 한다.
크로마토그래피 결과 노란색, 진한 녹색, 연한 녹색, 연한 노란색으로 4개의 층으로 분리 되는 것을 볼 수 있다. 이는 내려오는 시간에 따라 색소를 분리한 결과, 카로틴(carotene)은 노란색, 엽록소a (chlorophyll-a)는 진한 녹색, 엽록소b(chlorophyll-b)는 연한 녹색, 크산토필(Xanthophyll)은 연한 노란색 이라는 것을 알 수 있다. 다음으로 스펙트럼 측정 결과 Chlorophyll-a, Crude, Xanthophyll, 광합성cell이 625nm에서 peak을 가지며, Chlorophyll-b, Carotene은 650nm에서 peak을 가진다. 또 Carotene을 제외하고 나머지는 또 하나의 peak을 가지는데 Crude는 675nm에서, 나머지는 650nm에서 가지는 것을 알 수 있다.

참고자료

· 없음