[유전학 실험][서울대] Electroporation을 이용한 Transfection

소개

[서울대학교]
유전학 실험 레포트로서, 실험목적은 CEF(Chicken Embryo Fibroblast) cell에 우리가 원하는 DNA를 Electroporation을 통해서 transfection시키는 것입니다.

레포트에는 Electroporation과 Transfection에 대한 기본 개념적 설명과
PBS, FBS, DMEM등의 배지과 시약에 관한 설명을 기입했습니다.

또한, 실험도구들의 설명과 함께 실험에 쓰인 시약들, 배지들에 대한 자세한 설명을 적어놨습니다.

목차

1. Introduction and Abstract

2. Materials and Method
Material and Media >
Method >

3. Results and Discussion

4. Reference

본문내용

이번 실험은 저번 주에 isolation시킨 CEF(Chicken Embryo Fibroblast) cell에 우리가 원하는 DNA를 Electroporation을 통해서 transfection시키는 것이다. 이를 위해서 우선 배양중인 CEF cell을 일정량 채취하여 incubation시키고 이를 hemocytometer를 이용해서 cell count한다. 이후 Electroporation시키기 위해 일정 cell을 일정한 volume에 setting하고, 우리가 CEF에 넣고자 하는 DNA과 함께 이를 큐벳에 넣어서 전기를 가해준다. 이를 통해서 CEF에 우리가 원하는 DNA(CMV-GFP)를 Transfection시켜준 후에 이를 형광물질 발현을 통해 잘 들어갔는지 확인 하는 것이 이번 실험 내용이다.

※ Electroporation : 고압의 전압으로 세포를 자극하여 세포에 micropore를 생성하여
주변의 DNA가 직접 세포내로 유입되도록 하는 방법

※ Transfection : DNA에 의한 형질전환(transformation)과 감염(infection)을 합친 것.
정제된 phage DNA를 세균에 감염시키는 것이다. 현재로는 phage DNA에
한정하지 않고 plasmid DNA를 사용한 형질전환에도 사용된다.

참고자료

· ① Bric 실험 (http://bric.postech.ac.kr)
· ② Transfection, 동물유전육종학 및 실험 실습자료.