Agarose gel electrophoresis of DNA

소개

Agarose gel electrophoresis of DNA

목차

전기영동이란
전기영동의 종류
Agarose 란?
Agarose gel
겔 전기영동(gel electrophoresis)
Agarose gel의 특성
DNA의 구조
Agarose gel 전기영동법
Agarose gel
Agarose gel 전기영동 원리
TAE와 TBE의 비교
Agarose gel 전기영동 시 DNA의 이동에 영향을 주는 요인들
전기영동시 실험설정
DNA 전기영동 VS 단백질 전기영동
실험시 주의사항
실험방법
실험재료

본문내용

전기영동의 목적
원하는 단백질의 유무 확인, 분자량을 이미 알고 있는 단백질과 비교하여 분자량 산출
-전하를 띠고 있는 물질이 전기장 내에서 움직이는 성질을 이용하여 그 물질을 분리, 분석하는 방법
→ 생체 내의 고분자 중에는 핵산 및 단백질이 전하를 띠고 있는 대표적인 물질
(1) 전기영동법의 원리
① 전기영동은 전기장 안에서 하전 된 입지가 양극 또는 음극으로 이동하는 현상.
② 이동하는 속도는 입자의 전하량, 크기와 모양, 용액의 ph와 점성도, 용액에 있는 다른 전해질의 농도와 이온의 세기, 지지체의 종류 등 여러 가지 요인에 의해 결정. 즉, 분자 자체의 성질에 따라서 결정된다.
③ 전기영동법은 아미노산, 뉴클레오티드, 단백질들과 같은 하전 된 물질들을 분리하거나 분석하는데 매우 효과적인 수단으로 이용.
전기영동의 종류
Agarose 란?
겔화되어 힘이 센 중성 다당류의 하나
생체 물질을 분리하는 여과재
단백질이나 효소 따위를 특이하게 고정화하는 우수한 고분자 다당류 지지체
Agarose gel
Agarose는 갈락토스와 겔리듐 아만시의 한천으로부터 유도된 3,6-안하이드로갈락토스 단위체들로 구성되는 천연의 다당류
→Agarose gel을 이용한 전기영동은 가장 큰 거대 분자와 그 복합체인 바이러스, 효소 복합체, 지질단백질, 핵산 등의 전기영동에 이용되고 있다.
높은 온도에서 녹고 낮은 온도에서 굳으며 굳을 때 많은 구멍을 가지는 성질을 이용
겔은 전분 겔과 유사한 방법으로 끊는 물에 건조한 중합체를 넣고 상온에서 식힘으로써 얻어진다. 전분 겔보다 다공성 구조이며 적절한 강도를 가진다
겔 전기영동(gel electrophoresis)
DNA나 RNA, 단백질과 같은 큰 분자들을 전기적인 힘을 이용하여 겔에서 이동시켜 크기에 따라 서로 분리하는 기술이다
DNA나 RNA의 경우 주로 Agarose를 사용하고, 단백질의 경우 Polyacylamide 등을 굳혀서 겔을 만든다
전기영동은 이와 같은 원리를 이용하여 분자량 결정을 비롯하여 등전점이나 순도결정, 각 성분의 정량, 정제 등에 이용되고 있으며, 단백질이나 핵산의 주된 분리분석법이 되고있다

참고자료

· 없음