Cellcounting

소개

Cellcounting

목차

1. 실험제목
2. 실험목적
3. 기구 및 시약
4. 이 론

본문내용

1. 실험제목
→ Cell counting과 Growth curve


2. 실험목적
→ 생균수의 측정방법과 growth curve를 작성 할 수 있다.


3. 기구 및 시약
1) 기구
① Hemo-cytometer
- 일정한 부피에 존재하는 세포의 수를 현미경으로 관찰
- 총 세포수를 측정하는 방법
- 생 세포수를 측정하기 위하여 보통 trypan blue 염색법사용
- 깊이가 알려진 정해진 면적내의 세포의 수는 현미경을 통해 셀 수 있고, 그 수로부터 cell concentration을 알아낼 수 있다
- 보통 Virus Transfection 하기 하루 전에 cell을 well plate에 plating 한다. Transfection을 위해서는 cell의 density가 culture vessel의 50 내지 70% 정도가 되어야 하므로 cell을 detach 한 후 hemocytometer를 이용하여 cell 갯수를 counting한 후 well plate의 경우 약 2 x 105 개 정도의 cell을 plating 한다. 이 갯수는 cell line 에 따라 다소 다르므로 예비실험으로 다양한 농도로 cell을 plating 한 뒤 다음날 현미경으로 cell density를 관찰하고 적당한 갯수를 정하여 본 실험에 사용하는 것이 바람직하다.
② 24well
- 일반적으로 Virus 감염 및 세포의 생존수 측정시 사용된다.
- 주의해야 할 것은 옆의 다른 세포에 대한 감염주의이다.
- Well 뚜껑을 덮은 뒤에는 충분히 밀봉해야 한다.

③ 그 밖의 다른 기구들
- Cover glass
- Counter 기기
- Kim wipes
- 모눈종이

2) 시약
- Trypan blue
→ 수용성이고 알콜에는 불용성, 물에 녹이면 보라색을 띠는 물질이다.

참고자료

· 없음