생물학 실험 보고서 - 효소의 특성

소개

효소는 생명체 내부의 화학 반응을 매개하는 단백질 촉매이다.(1) 보통 일반적인 효소는 상온에서 체온 정도의 조건, 중성 pH에서 잘 작동한다. 이 실험에서는 효소의 작용에 온도와 염도, pH가 미치는 영향을 알아보게 된다. 이 실험에서 사용하는 아밀라아제는 소화 효소 중에 하나로, starch를 말토스와 덱스트린으로 분해하게 된다(2).

목차

없음

본문내용

Material
 α-amylase (Bacillus amyloliquefaciense), 1% Starch 용액, 0.1N Iodine 용액
 TE buffer (10mM Tris- 1mM EDTA buffer, pH 3.0, pH 7.0, pH 10.0)
 DW
 NaCl 용액 (5%, 10%, 20%)
 Water bath 2개(40℃, 70℃)
 Spectrophotometer
 얼음
 시험관, 시험관대, 파이펫, 온도계

Method
 시험관 여섯 개에 각 1% starch 2ml와 증류수 1ml를 넣고 pH 3.0, 7.0, 10.0의 TE buffer를 1ml 각각 두 개의 시험관에 넣었다(총 여섯 개의 sample)
 Starch가 잘 섞이도록 vortex하고 준비된 sample을 70 ℃의 water bath에서 5분간 pre-warming 하였다.
 3개의 시험관(실험군)에 a-amylase 40ul을 넣고 여섯 개의 시험관 모두에 0.1N의 Iodine을 20ul 넣었다.
 다시 vortex를 하여 잘 섞이게 하고 샘플들을 70 ℃의 water bath에 10분 간 두어서 반응이 일어나도록 하였다.
 20ul의 iodine을 더 넣고, 시험관의 색을 관찰하였다.
 spectrophotometer를 이용하여 O.D 값을 측정하였다.
 같은 방법으로 반응을 할 때의 water bath의 온도를 0 ℃, 40 ℃, 70 ℃로 달리하고, salt con.도 0%, 5%, 10%, 20%로 달리하여 온도와 염도가 효소의 활성에 미치는 영향을 측정하였다.

참고자료

· (1) http://ko.wikipedia.org/wiki/%ED%9A%A8%EC%86%8C, Wikipedia – 효소
· (2) http://ko.wikipedia.org/wiki/%EC%95%84%EB%B0%80%EB%9D%BC%EC%95%84%EC%A0%9C , Wikipedia – 아밀라아제
· (3) http://100.naver.com/100.nhn?docid=94763 , 두산백과사전 – 소화효소
· (4) http://100.naver.com/100.nhn?docid=814972 , 두산백과사전 - 효소반응의 최적온도 [酵素反應-最適溫度]
· (5) http://ko.wikipedia.org/wiki/%EC%85%80%EB%A3%B0%EB%A1%9C%EC%98%A4%EC%8A%A4 , Wikipedia –셀룰로스
· (6) http://100.naver.com/100.nhn?docid=118031 , 두산백과사전 – 아이오딘녹말반응
· (7) http://100.naver.com/100.nhn?docid=174484 , 두산백과사전 - 효소 [酵素, enzyme]