[생화학] 생화학 실험 중요 포인트 요약 노트

목차

Amino Acid Titration
가. Amino Acid의 ampholytes 로서의 성질
나. Henderson-Hasselbalch Equation
다. Amino Acid의 Titration과 pH buffer 작용
라. 여러가지 Amino Acid의 산-염기 성질
마. Amino Acid Titration의 의의

Protein 정량분석 (뷰렛법/로우리법)
가. Protein 정량의 개요
나. 주요한 Protein 정량법
다. Spectrophotometry의 기본 원리
라. Standard Curve와 Least-Square Method

Protein Seperation & Purification
가. Protein Seperation 에 사용되는 기본 원리
나. 단백질 추출
다. 단백질의 정제법

SDS-PAGE
가. Electrophoresis의 기본 원리
나. 불연속 겔 전기이동법 (Disc-gel Electrophoresis) 법
다. SDS-Gel Electrophoresis
라. Acrylamide Gel 제조에 사용되는 Agent

Enzyme Assay
가. Enzyme과 inorganic Catalytic Agent와의 차이점 / 공통점
나. Enzyme의 Substrate Specitify
다. Enzyme Kinetics의 의의
라. Michealis-Menton 식과 Km, Vmax 의 의미
마. Lineweaver-Bulk Plot
바. Inhibition과 Michealis-Menton Equation
사. Enzyme 반응 속도의 측정법

The Preparation of Genomic DNA & Plasmid DNA from Bacteria
가. Agarose gel Electrophoresis

Bacterial Transformation
가. Transformation
나. Simple Transformation
다. Eliminating Restriction System of E.Coli

Physical Properties of DNA
가. Denaturation and Melting Curve of DNA
나. Double-Helix DNA의 Stability에 영향을 미치는 Factor들
다. Renaturation and C0t Value
라. Hyperchromic Effect & C+G ratio Estimation
마. Diphenylamine 분석법에 의한 DNA의 정량

Southern Blotting
가. Blotting Technique
나. Prototype of Sourthern Blotting
다. ECL Method
라. Trp ED Gene

Carbohydrate 정성분석
가. Carbohydrate의 기본 구조
나. Carbohydrate의 정성분석법

본문내용

다. Amino Acid의 Titration과 pH buffer 작용
Amino Acid를 NaOH와 같은 염기로 Titration을 하여 얻어지는 Titration Curve는 적정하는 Amino Acid의 pH buffer 작용을 잘 설명해 준다.
즉 Amino Acid의 Carboxyl기는 Weak Acid이므로 NaOH-와 같은 Strong Base와 반응하면 일정한 pH 범위 내에서 큰 pH 변화를 일으키지 않는 pH Buffer 작용을 한다는 것이다.
그림 4 는 0.1 M alanine을 0.1 M NaOH로 적정한 Titration Curve이다. 적정의 초기에서는 대부분의 Alanine은 완전히 Protonated된 상태, 즉 +NH3-CHR-COOH의 상태로 존재한다. 그러나 첫번째의 buffering Point에서는 Alanine은 +NH3-CHR-COOH의 상태와 +NH3-CHR-COO-의 상태로 동시에 존재하며 pK1 지점은 이 두가지 Alanine form의 양이 동일한 지점, 즉 pH = pK1인 지점을 의미하며 Alanine의 Carboxyl 기의 pK'는 이 때의 pH 값인 2.34이다.
염기인 NaOH가 Alanine과 동량이 첨가된 지점인 pH = 6.01 지점은 모든 Carboxyl기가 Deprotonated되고 +NH3-CHR-COO- 의 상태로 존재하는 지점이다.

참고자료

· 없음