DNA 전기영동 & Plasmid DNA isolation

목차

①DNA 전기영동
■Agarose ?
②Plasmid DNA isolation

본문내용

①DNA 전기영동

전기영동(electrophresis)이란 전하를 띠고 있는 물질이 전기장 내에서 움직이는 성질을 이용하여 그 물질을 분리, 분석하는 방법을 말한다. 생체 내의 고분자 중에는 핵산 및 단백질이 전하를 띠고 있는 대표적인 물질로서 전기영동을 이용하는 실험의 주요 대상이 된다.
이 전기영동법은 1930년대 Tiselius가 처음으로 도입하였다. Tiselius는 관에 있는 완충액 사이에 단백질 혼합물을 넣고 전기장을 걸어줌으로써 시료성분이 각각의 전하와 이동도에 따라 일정한 방향과 속도로 이동하는 것을 발견하였다.(1948년 노벨상) DNA의 인산은 하나의 음전하를 띄고 있으며, 수천 개의 염기가 연결된 DNA절편은 그만큼의 음전하를 띤다. 따라서 전기장이 걸리면 DNA는 양극으로 끌리는데 그 이동속도는 전압, 매질의 종류, DNA분자의 크기와 모양 등에 의해 결정된다. 전기영동은 전기장에서 분자가 매질을 통과하게 하여 물질을 분리하는 방법이다

■Agarose ?

 Agarose란 우뭇가사리나 꼬시래기같은 한천질을 가진 홍조식물류를 수확하여, 세척-자숙(고열로 끓임)-여과-응고-동결-융해-탈수-건조의 과정을 반복하여 한천(agar)를 만든 뒤 한천에서 agaorse 구성 성분을 제외한 불순물(agaro-pectin과 칼슘, 나트륨, 황 등)을 정제과정을 통해 분리, 제거하여 백색 분말형태로 만든 시약이다




②Plasmid DNA isolation

■플라스미드 ?

세균의 세포 내에 염색체와는 별개로 존재하면서 독자적으로 증식할 수 있는 DNA로, 고리 모양을 띠고 있으며 세균의 생존에 필수적인 유전자는 아니다. 유전공학에서는 세균 내 플라스미드를 세포 밖으로 빼내고 제한효소(制限酵素)로 끊은 뒤, 필요로 하는 유전자를 삽입하여 이를 다시 세균에 넣어 배양하는 유전자재조합 기술을 사용한다.

참고자료

· ●분자생물학강의
· ●네이버 백과사전
· ●http://www.docson.com/view.html?no=2868666
· ●http://www.genosapiens.co.kr/agarose.htm