동물세포배양 과 MTT assay

소개

동물세포배양 과 MTT assay

목차

Ⅰ. 동물세포배양
1. cell line(세포계)
2. pH의 조절
6. 빛의 공급
Ⅱ. MTT assay

본문내용

Ⅰ. 동물세포배양

배양세포는 실험 동물의 한기관에서 얻은 세포의 성장으로부터 유래된 것이다. 세포배양은 조직 의 일부분을 무균적으로 떼어내 효소로 세포간 연결 물질을 분해하여 유리시킨 현탁액을 병이 나 페트리 접시와 같은 편편한 밑부분에 도말한다. 일반적으로 세포는 유리표면에 부착할 수 있 는 당단백질성 물질을 생산한다. 이때 글라스나 페트리접시에 부착한 세포의 엷은층 즉 단층 (monolayer)에 적당량의 배양액을 덛붓는다. 세포배양에 사용되는 배양기 조성은 꽤 복잡하다. 즉 많은 수의 아미노산과 비타민, 염류, 포도당 그리고 중탄산염완충용액이다. 최적세포생장을 얻기 위해서는 소량의 혈청이 필요하며, 세균 감염을 방지하기 위해서 몇 종의 항생제를 첨가한다.
이같이 마련된 무한 생장능이 있는 세포배양기는 영속세포계로 안정화시킬 수 있다. 이런 세포계는 계속적으로 세포를 이용할 수 있기 때문에 바이러스 연구에 아주 편리하다. 영속 세포계를 얻을 수 없는 경우에는 수일 동안 살아남을 수 있는 일차 세포배양(primary cell culture)이 이용된다. 물론 이런 방법은 배양을 수시로 새로이 마련해야 한다.
또 다른 경우는 전체 또는 일부 기관을 배양하는 방법이다. 제어된 실험실 조건하에서 바이러스 생장이 가능하기 때문에 기관 배양(organ culture)방법도 이용될 수 있다.

1. cell line(세포계)

동물세포를 오랜 기간 배양하려는 시도는 항상 실패해 왔다. 신선한 배지를 계속 갈아주어도 증 식은 50세대 이상 계속되지 못했다. 그러나 경우에 따라 세포는 돌연변이에 의해 무한정 성장할 수 있는 능력을 지니기도 하는데, 그러한 불멸세포의 자손들을 세포계(cell line)라 한다. 일부 세포계는 배양시 암세포처럼 행동하지만, 다른 것들은 접촉억제를 나타낸다. 배양된 세포가 접촉억제를 잃어버리면 형질전환(transformation) 되었다고 한다. 형질전환실험은 종양비루스와 함 께 발암물질을 검사하는 유용한 수단으로서, 세포를 화학물질이나 비리온의 현탁액과 함께 혼합 하여 배양하고 형질전환된 세포집단의 수를 측정하는 것이다.

참고자료

· 없음