vectors, restriction enzymes and agarose gel electrophoresis

소개

restriction enzyme를 이용하여 vector를 자른 후 agarose gel 상에서 electrophoresis하여 얻은 결과로 restriction mapping을 하는 실험보고서

목차

1. abstract
2. introduction
3. material & method
4. result
5. discussion
6. reference

본문내용

cloning vector는 원하는 유전자를 세포내로 운반하고 재조합하는 역할을 한다. 일반적으로 사용되는 vector는 여러 restrictions enzyme 절단부위가 밀집된 부위인 MCS(multiple cloning site)를 가지고 있어서 insert DNA의 복제에 편리하며 항생제 내성 유전자를 가지고 있어 세포내로 DNA가 들어온 세포만을 판별할 수 있다.
cloning vector는 plasmid, bacteriophage, cosmid, YAC등이 있는데 이중 plasmid가 가장 널리 쓰이는 vector이다. plasmid는 bacteria의 세포 내에 염색체와는 따로 존재하면서 독자적으로 증식할 수 있는 DNA로 고리 모양을 하고 있으며 bacteria의 생존에 plasmid의 존재가 필수적인 것이 아니지만 다른 종의 세포 내로 전달되는 특성을 가지고 있다. plasmid에는 약제에 대한 저항성을 가진 내성인자(R인자)와 세균의 자웅을 결정하는 성을 결정하는 인자(F인자) 등이 발견되고 있다. 유전공학에서는 bacteria안의 plasmid를 세포 밖으로 빼내어 restriction enzyme으로 자른 뒤 외부의 유전자를 삽입한 뒤 이를 다시 bacteria에 넣어 배양하는 recombination DNA를 만드는데 사용한다. 예를 들면 사람의 인슐린을 만드는 데 관여하는 DNA fragment를 restrictions enzyme으로 자른 plasmid에 끼워 맞춰 다시 E.coli의 세포 내로 돌려보내면 다른 종류의 DNA fragment를 가진 recombination plasmid는 E.coli가 증식할 때마다 인슐린을 만들게 된다.

참고자료

· Robert F. Weaver, 분자생물학, Life science, 2000, pp.52~55
· Leon A.Snyder, 일반유전학, 아카데미 서적, 1999, pp.501~502
· 박영순, 유전공학, 탐구당, 2002, pp.74~84.