유전자 재조합과 생명공학

소개

유전자 재조합의 개요와 유전자 재조합 방법 및 생명공학에 응용에 대한 내용이
그림을 이용해 알기 쉽게 설명되어 있음

목차

1. INTRODUCTION TO BIOTECHNOLOGY
1) RECOMBINANT DNA TECHNOLOGY

2. TOOLS OF BIOTECHNOLOGY
1) SELECTION & MUTATION
2) RESTRICTION ENZYMES (제한효소)
3) VECTORS
4) POLYMERASE CHAIN REACTION (PCR)

3. TECHNIQUES OF GENETIC MODIFICATION
1) INSERTING FOREIGN DNA INTO CELLS
2) OBTAINING DNA
3) SELECTING A CLONE
4) MAKING A GENE PRODUCT

4. APPLICATIONS OF rDNA
1) THERAPEUTIC APPLICATIONS
2) THE HUMAN GENOM PROJECT
3) SCIENTIFIC APPLICATIONS
4) AGRICUTURAL APPLICATION

본문내용

2.RESTRICTION ENZYMES
박테리아가 특정 phage로부터 자신을 보호하기 위해 phage의 DNA를 가수분해 하는데 사용되는 효소
박테리아 DNA는 cytosine을 메틸화시켜 restriction enzyme에 의해 가수분해 되지 않도록 보호
DNA의 특정 sequence(pallindrome구조) 인식하고 cut
Sticky end: restriction enzyme에 의해 처리된 DNA fragment의 말단에서 하나의 DNA strand가 더 길게 신장된 부분으로 그것은 다른 sticky end와 상보적인 염기쌍을 형성하여 결합할 수 있기 때문에 붙여진 이름
Blunt end: 점착성 말단을 형성하지 않는다.

Blunt end를 sticky end로 만들어 형성한 recombinant plasmid
-필요한 효소: terminal transferase ★
-Plasmid의 한 지점 cut 하여 blunt end 형성
-Cut한 plasmid에 dA(deoxyadenosine)와 terminal transferase 첨가하여 2개의 strand 3’end에 poly dA tail 형성
-linear DNA의 fragment (blunt end)에는 dT(deoxythymidine)과 terminal transferase 첨가하여 2개의 strand 3’end에 poly dT tail 형성
-위의 두 plasmid 와 DNA 의 점착성 말단이 상보적 결합 형성하여 Recombinant Plasmid 형성
 Blunt end를 sticky end로 만들어 형성한 recombinant plasmid
- 필요한 효소: terminal transferase ★
- Plasmid의 한 지점 cut 하여 blunt end 형성
- Cut한 plasmid에 dA(deoxyadenosine)와 terminal transferase 첨가하여 2개의 strand 3’end에 poly dA tail 형성
- linear DNA의 fragment (blunt end)에는 dT(deoxythymidine)과 terminal transferase 첨가하여 2개의 strand 3’end에 poly dT tail 형성
- 위의 두 plasmid 와 DNA 의 점착성 말단이 상보적 결합 형성하여 Recombinant Plasmid 형성

참고자료

· MICROBIOLOGY 9판, 저자 TORTORA/FUNKE/CASE