한컴오피스 
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미리보기
소개
배추 DNA에 유전자를 추출하여 로딩시키는 과정을
실험에 따라 일일이 나열해서 결과 포함.목차
1. Extraction of DNA
2. 추출 DNA를 이용한 PCR 및 전기영동
a. 실 험 목 적
b. 실 험 도 구
c. 이 론 및 방 법
d. 실험 방법
e. 결과 및 고찰본문내용
1. 실 험 목 적
- 하이드로마이신 내재 DNA를 이용하여 PCR을 통해 적정 cycle 수에 비례하게 그 양을 증폭시
킬 수 있다. ( PCR의 목적 : 특정 염기서열을 선택적으로 증폭가능 )
- PCR의 모든 반응 종결 후 전기영동을 통하여 band의 유, 무로 DNA의 증폭 결과를 알 수 있다.
2. 실 험 도 구
- Template DNA(NPTⅡDNA), forward/revers Primer(특정부분결합), PCR buffer,
dNTP(dATP, dTTP, dCTP, dGTP), Taq polymerase, dH2O, 1.5㎖ Tube, Pipet, Thermal
Cycler machine, 스티로폼, 얼음, rack, 전기영동(1.5% Gel, marker, dye, EtBr, UV선-확인)
3. 이 론 및 방 법
(1) PCR 단계 : 3가지 단계의 반복 → 특정 DNA 부분의 증폭
- 94 ℃ / 3min
- 95 ℃ / 30sec : Denaturation (변성) - double strand 의 DNA가 single로 나뉜다.
- 58 ℃ / 30sec : Annealing (가열냉각) - primer이 상보적인 template에 붙게 된다.
- 72 ℃ / 1min : Primer extention (확장) - polymerase와 dNTP에 의해 primer가
- 72 ℃ / 5min : extension 즉 Elongation 된다.
- 4 ℃ Store (보관)참고자료
· 없음태그
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